《A20的O-GlcNAc糖基化修飾介導的血管損傷後保護及分子機制》是依託揚州大學，由張振剛擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：A20的O-GlcNAc糖基化修飾介導的血管損傷後保護及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張振剛
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
炎症激活是血管損傷後血管壁重構的一個重要病理機制，目前尚無特異性的治療藥物。我們近來研究顯示，葡糖胺可通過增加局部O連線的N已醯葡糖胺（O-GlcNAc）修飾水平有效減輕損傷血管炎症激活及內膜增生，但其分子機制不清楚。A20作為內源性NF-kB通路活化的關鍵負性調控分子，本項目研究旨在測試假說：增加血管平滑肌細胞內A20的O-GlcNAc修飾，通過反饋抑制轉錄因子NF-kB的激活而發揮抗炎及血管保護效應。為此，本研究將通過免疫共沉澱、體外糖基化修飾分析、基因沉默等多種方法共同闡明A20的O-GlcNAc修飾對其生物活性、NF-kB通路活化的影響及機制，揭示A20 O-GlcNAc修飾在調控血管平滑肌細胞炎症反應應答以及血管損傷後血管重構中的作用，從而在分子、細胞及整體水平剖析A20 O-GlcNAc修飾發揮抗炎及血管保護的作用機制，為研發新型血管保護藥物提供新的思路和分子藥物干預靶標。
結題摘要
炎症激活是血管損傷後血管壁重構的一個重要病理機制，目前尚無特異性的治療藥物。我們近來研究顯示，葡萄糖胺可通過增加局部O連線的N已醯葡糖胺（O-GlcNAc）修飾水平有效減輕損傷血管炎症激活及內膜增生，但其分子機制不清楚。近年來大量的研究證實，血管損傷局部的炎症反應在血管重構過程中發揮重要的作用，抑制NF-kB信號通路的過度激活能有效抑制血管損傷後新生內膜的形成。本項目研究通過利用大鼠血管平滑肌細胞培養，免疫共沉澱、基因沉默等多種方法探討葡萄糖胺是否可通過促進A20的O-GlcNAc修飾來增強其對NF-kB通路活化的抑制，從而介導葡萄糖胺的血管保護效應。我們發現GlcN或OGT抑制劑thiamet G處理培養的血管平滑肌細胞可促進A20的O-GlcNAc修飾，同時增強A20與TAXBP1的結合來增強其活性。過表達A20可進一步增強thiamet G對TNF-a誘導的IkBa的降解，p65激活以及DNA結合的抑制，以及促炎細胞因子表達，細胞遷移及增殖；相反，沉默A20的表達可顯著減弱上述ThiametG介導的效應。在球囊拉傷的大鼠頸動脈損傷模型中，我們觀察到GlcN治療可顯著抑制抑制損傷血管局部p65激活和新生內膜形成，局部注射腺病毒編碼的A20-shRNA可有效抑制血管損傷局部的A20表達和p65激活，從而廢除GlcN介導的血管保護作用。這些研究結果提示，GlcN主要通過促進A20的O-GlcNAc修飾來增強其生物學效應，從而抑制NF-kB信號通路介導的血管炎症反應及重構，而A20是GlcN發揮血管保護的主要作用分子靶標。本項目研究對開發新型的血管損傷保護劑以及預防血管成形術後再狹窄治療具有重要的科學意義。
