蛋白質沉降分析(sedimentation analysis of protein)是2014年公布的藥學名詞。
基本介紹
- 中文名:蛋白質沉降分析
- 外文名:sedimentation analysis of protein
- 所屬學科:藥學
- 公布時間:2014年
蛋白質沉降分析(sedimentation analysis of protein)是2014年公布的藥學名詞。
蛋白質沉降分析(sedimentation analysis of protein)是2014年公布的藥學名詞。定義使用超速離心的方法來分離純化蛋白質或者測定其分子量(相對分子質量)的方法。蛋白質在高達50萬g的重力作用...
蛋白質沉澱 蛋白質沉澱,外文名precipitation,破壞蛋白質分子的水化作用或者減弱分子間同性相斥作用的因子,使蛋白質在水中的溶解度降低而沉降下來轉化為固體的分離方法。用於蛋白質沉澱操作的方法很多,如等電點沉澱、鹽析、有機溶劑沉澱、加入非離子型聚合物沉澱。加入聚電解質沉澱等。
和沉降平衡(Sedimentation Equilibrium)兩種。通過沉降速率實驗可以測定蛋白質在溶液中的構象大小、聚集狀態,通過沉降平衡實驗可以精確地測定蛋白質的分子量以及解離常數。 1. 絕對/相對分子量測定 2.樣品純度,濃度測定 3. 分子的聚合,解離分析 4. 熱動力學和流體力學參數確定 5. 核算,蛋白及病毒測定與分。
根據所提蛋白質的特性和純度的要求,用適當的方法使蛋白質分離出來,如沉澱法:包括鹽析法、PEG法、等電點法、有機溶劑法、熱變性法。蛋白質或多肽的純化主要採用凝膠過濾、纖維素層析法、電泳法、高壓液相法和超離心法等。蛋白質的純度鑑定主要採用電泳分析法、沉降分析法、擴散分析法、超離心法、HPLC法等。
以蛋白質為例待看到樣品峰的尖端後即可以間隔照相。照完相即可關機,取出樣品液,清理轉頭和分析池。照相用強反差顯影沖洗後即得Schlieren光路沉降圖形照片。(3)沉降圖像測量:Schlieren沉降圖可以用比長儀,讀數顯微鏡,或投影儀測量。測量時把沉降圖像的底片放於測量儀器上,使液面的垂直線與測量儀中的垂直線重合...
4-2 酵母雙雜交系統篩選相互作用的蛋白質 4-3 免疫共沉澱檢測蛋白質的相互作用 4-4 蛋白質亞細胞共定位 4-5 融合蛋白沉降技術分析蛋白質的相互作用 模組五 蛋白質與核酸相互作用的研究 5-1 啟動子調控元件分析 5-2 電泳遷移率實驗分析 5-3 染色質免疫沉澱法分析 5-4 細胞瞬時相互作用分析 5-5 酵母單雜交...
主要研究蛋白質、核酸等不同分子間或同類分子或亞基間的相互作用,測定/模擬蛋白質的四級結構,測定蛋白質分子的形狀、大小和浮力密度、沉降係數和絕對分子量、蛋白質樣品的純度,研究蛋白質或核酸生物製品的配方、穩定性,測定結合/解離常數等。其功能符合了當今分子生物技術的發展趨勢,因而在學術界和生物技術產業界的...
1~5000ul,最大10ml; 分液注射器:2.5ml(9)記憶效應:小於0.05%(10)檢測器系統兼容性:能夠與市面上流行的示差折光檢測器、紫外檢測器及多角光散射檢測器兼容,並直接通過Postnova的軟體進行控制。主要功能 主要套用於快速、溫和分離生物高分子、蛋白質聚集體和納米粒子,並對其分子量或粒徑進行表征。
沉降平衡法是樣品溶液實驗達到平衡是指用光學系統已測不到分析池內樣品濃度分布的變化時間。將所得數據處理可計算出蛋白質的精確相對分子質量。用沉降平衡實驗測量相對分子質量是一種經典的相對分子質量測量手段。在實驗時使用分析用的超速離心機,為正確求出濃度分布有必要用干涉光學系統或光電掃描裝置。由於實驗技術和...
第4章 套用圓二色光譜分析蛋白質蛋白質相互作用 第5章 核磁共振譜分析蛋白質一蛋白質相互作用 第6章 套用表面等離子共振技術研究視紫紅質一G蛋白相互作用 第7章 使用光散射技術確定蛋白質複合物的化學計量 第8章 沉降平衡研究 第9章 模擬小區帶凝膠過濾色譜法檢測蛋白質一蛋白質相互作用 第10章 螢光凝膠...
1926年T.斯韋德貝里和R.法勞斯測定了馬血紅蛋白的分子量為 68000。以後不斷地對各種蛋白質進行分子量測定,結果得到重複的分子量,因此證實了蛋白質確實是一個高分子化合物,有一定大小和形狀,而不是一些低分子單元任意的排列和聚合。在其他各種技術配合下套用超離心沉降分析測定的分子量範圍為102~106,僅有百分之...
蛋白質的分離純化可根據蛋白質分子的大小、電荷量、溶解度以及親和性結合部位的有無,建立許多分離純化的方法。常用的有離心分離、沉澱分離、透析法、超濾法、層析分離、膜分離以及酶法分離等。這些分離純化蛋白質的方法各有利弊。離心分離 離心分離是利用不同物質之間的沉降係數或浮力密度等差異,用離心力場進行的一項...
離心分離是利用不同物質之間的沉降係數或浮力密度等差異,用離心力場進行的一項分離、濃縮或提煉的物理分離分析技術。沉澱分離 沉澱分離是使用最廣泛的酪蛋白組分分離技術,它主要是利用各酪蛋白組分在不同濃度溶液中的溶解性以及對溫度、離子強度以及鈣離子的敏感性差異而實現分離。根據酪蛋白組分在不同濃度尿素溶液中的...
第四節 超離心沉降速度法 第五節 凝膠色譜法 第六節 SDS—PAGE法 第十一章 高效液相色譜 第一節 基本概念 第二節 常用高效液相色譜法類型與分離機制 第三節 高效液相色譜儀 第十二章 蛋白質分子一級結構的測定 第十三章 蛋白質空間結構分析 第十四章 蛋白質和多肽的化學合成技術 第十五章 蛋白質的...
(1) 根據分子大小不同的分離方法:透析和超過濾(利用蛋白質分子不能通過半透膜的性質);密度梯度離心(蛋白質在介質中離心時質量和密度較大的顆粒沉降較快);凝膠過濾(一種柱層析)(2) 利用溶解度差別分離:等電點沉澱法(由於蛋白質分子在等電點時淨電荷為零,減少了分子間靜電斥力,因而容易聚集沉澱,...
由於生物大分子特殊的結構性質,該結構測定方法的第一個步驟一一生長晶體是最關鍵的步驟,也是最困難的步驟,能否生長出合用的、較高質量的蛋白質晶體是結構測定成功與否的關鍵。生物大分子晶體生長是一複雜的動態過程,受多種物理、化學和生物學因素的影響。其中,重力驅使的沉降和對流等現象也會影響晶體生長的質量。...
超離心法指的是通過利用蛋白質在離心場中的沉降行為不同(沉降行為取決於蛋白質的大小等許多因素)對蛋白質進行的非破壞性直接分離、分析,並具有很好的準確性。超離心分析可以得到蛋白質結構的一些有用信息,如相對分子質量、沉降係數等。分析時可以採用沉降速率、沉降平衡兩種研究方法,通過相應的光學系統對樣品中的蛋白...
一方面由於重力作用,按蛋白質分子的大小以不同的速度向器底沉降,另一方面蛋白質顆粒又從高濃度向低濃度擴散,在沉降和擴散的相互作用下,可使蛋白質顆粒最後達到平衡,稱沉降平衡。蛋白質顆粒在溶液中呈現穩定的連續分布即可形成某種濃度梯度,通過測定這種濃度分析就可以求出蛋白質的大小和分子量。
形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。原理 蛋白質的分離 通常第一維電泳是等電聚焦,在細管中(φ1~3 mm)中加入含有兩性電解質、8M的脲以及非離子型去污劑的聚丙烯醯胺凝膠進行等電聚焦,變性的蛋白質根據其等電點的不同進行分離。而後將凝膠從管中取出,用含有SDS的緩衝液處理30 min,使SDS...
有時,有些目標蛋白質以溶解的形式存在,可以通過在細胞破碎以前加入一些非極性的物質(如苯酚、甲苯)或者去垢劑,通過這個方法可以提高從大腸桿菌表達的人生長激素包涵體的收率。連續離心技術是工業生產中獲得包涵體最經常使用的操作。由於細胞碎片的密度比包涵體小,則沉降的速度比包涵體要小,連續的懸浮、離心可以把大...
通過免疫共沉澱聯合銀染及質譜測序技術、免疫共沉澱以及GST融合蛋白沉降技術我們發現PHF6能夠與PRC2複合體相互作用,並且敲低PHF6可以導致EZH2下游靶基因Wnt基因表達上調,提示PHF6可能招募PRC2複合體引起組蛋白甲基化修飾改變進而抑制Wnt通路,從而影響脂肪細胞分化和乳腺癌發生髮展。該研究為闡明PHF6在肥胖及乳腺癌發生...
若以S表示單位力場(ω2r=1)下的沉降速度,則 S=V (D-D’)/f S即為沉降係數。 沉降係數對於生物大分子來說,多數在(1~500)×10-13秒之間。為套用方便起見,人們規定1×10-13秒為一個單位(或稱1S)。一般單純的蛋白質在1~20S之間,較大核酸分 子在4~100S之間,更大的亞細胞結構在30~500S之間。
亞單位是指某個整體中的一部分,而同時又是構成該整體的重要組成,這些部分不能直接控制,需要主體去間接控制,這樣的主體組成部分,稱之為亞單位(或亞基,subunit),多用於蛋白結構分析和套用。示例 例如核糖體亞單位是核糖體由大、小兩個亞單位組成。由於沉降係數不同,核糖體又分為70S型和80S型。70S型核糖體...