超離心分離法

超離心分離法通常指用超速離心機分離高分子的方法。含有高分子的溶液(如核酸和蛋白質的溶液)受到強大的離心力作用時，如果這些高分子物質的密度大於溶液的密度就會沉降下來達到分離的目的。其沉降的速度既與其分子的大小和密度有關，也與溶液的分子密度和粘度及其分子的形狀有關。超速離心法也可用來測定高分子的分子量。

基本介紹

• 中文名：超離心分離法
• 目的：分離高分子
• 釋義：用超速離心機分離高分子的方法

最常用的有：①沉降速度法：用超離心法，增加蛋白質溶液的離心強度，當溶液所含蛋白質顆粒大小和形狀都相同時，這些顆粒以相同的速度移向管底，並形成清楚的界面;當溶液中有多種大小不同的蛋白質顆粒時，就會有幾個界面，用特殊的光學系統可以觀察到沉降界面，從而判斷出蛋白質的沉降速率。當沉降界面以恆速移動時，單位離心場裡的沉降速度稱為沉降常數，用S表示。用超離心法可以測出S，然後用一個公式即可計算出蛋白質的大小及分子量。②沉降平衡法：當一個含多種蛋白質的混合物在離心速度不太高的情況下，一方面由於重力作用，按蛋白質分子的大小以不同的速度向器底沉降，另一方面蛋白質顆粒又從高濃度向低濃度擴散，在沉降和擴散的相互作用下，可使蛋白質顆粒最後達到平衡，稱沉降平衡。蛋白質顆粒在溶液中呈現穩定的連續分布即可形成某種濃度梯度，通過測定這種濃度分析就可以求出蛋白質的大小和分子量。