菌種的培養

人們採取無菌操作的方法，把某種食用菌從混雜的微生物中，單獨地分離開來，這個過程叫做菌種分離。從分離過程中得到的菌絲體純化後，就是純菌種。在實驗室條件下，以人工使純菌種大量生長和繁殖的方法，叫做培養。

【說明】：此教學設計任務由南京曉莊學院現代教育技術課程老師yqiong參與教師-維基星光計畫進行wiki教學而發布。此詞條為範例詞條，由賈海選定主題並負責、參與現代教育技術課程的所有同學協作共同完成！

基本介紹

• 中文名：菌種的培養
• 外文名：The cultivation of the strains 
• 特點：採取無菌操作的方法
• 教學對象：大學學生
• 科目：生物
• 課時：2
• 教學環境：教室

學習者特徵

經過高中的學習，大部分對生物都有了比較具體的理解。進入大學以後要進行更為具體的生物研究，要進行分類。菌種的培養是微生物研究的必要過程，是今後在實驗室必要的實驗技能！菌種在有機實驗中也是基礎，所以，對於大部分同學來說，這是一個新鮮而沒有基礎的東西，一切從基礎開始！

學習內容

菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子製備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的製備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

種子製備包括孢子製備和菌絲體製備（見圖） 菌種製備 ，其中(1)～(4)為孢子製備過程。

保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續挑取少許，接入瓊脂斜面培養基上，在25℃（或較高溫度）下培養5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子（對於黴菌類孢子製備，多數採用大米、小米之類的天然培養基）。

將培養成熟的斜面孢子製成懸浮液，接種到扁瓶固體培養基上，於25～28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子於真空中抽乾，使水分降至10%以下，並放入 4℃冰櫃中備用。一次製得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。

放線菌孢子的培養基大多是採用麩皮或豌豆浸出液、牛肉膏及無機鹽與瓊脂製成的。將斜面孢子接入擴大的扁瓶孢子培養基中,於28～37℃培養5～14天。所獲得的大量孢子可直接作為種子罐(6)的種子。

如果有些生產菌種不產孢子，如赤黴素產生菌或產孢子不多的，則可採用搖瓶(5)液體培養製得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易於被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐(7)的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

教學目標

1. 弄清一級菌種的製作流程。

2. 弄清一級菌種的培養基的配製方法及其要求。

3. 弄清滅菌，消毒，菌種分離，提純，轉管，無菌操作概念及其操作方法。

4. 掌握一級菌種質量鑑定及其常見保存方法。

教學重點難點

1. 一級菌種培養基的配製。

2. 一級菌種培養基的滅菌。

3. 無菌操作（難點）。

策略選擇設計

多媒體教學（課內），實驗教學（課內及課外），技能訓練（實習期間）

從學生日常生活問題入手，快速自然的引導學生走進主題，明確本節課的學習目標，引發學生積極思考。

講授新課內容，以醒目的方式將條件語句的格式、功能和執行過程呈現給學生。

學生以小組合作的方式，在討論與探究中完成任務。

學生自己動手實踐，把培養基給學生，通過諸多問題驅動學生完成任務，課程安排形成循序漸進的梯度，充分挖掘學生潛力。

展示評價環節，讓學生在交流討論中明確條件選擇語句的執行流程及使用方法，在結束環節，以課後作業強化練習法結束本節課，使學生對條件語句的暫時記憶轉化為長期記憶。