納氏試劑分光光度法是指在強鹼溶液中氨(或銨)能與納氏試劑(碘化鉀的強鹼溶液)反應生成黃棕色膠體化合物。此顏色在較寬的波長範圍內具有強烈吸收，通常使用410-425nm 範圍波長光比色定量。
基本介紹
- 中文名：納氏試劑分光光度法
- 測定波長：420nm
1.概述
(1)方法原則碘化汞和碘化鉀的鹼性溶液與氨反應生成淡紅棕色膠態化合物，此顏色在較寬的波長範圍內具較強烈吸收。常測量用波長在410-425nm範圍。
(2)干擾及消除脂肪胺、芳香胺、丙酮、醇類和有機氯胺類等有機化合物，以及鐵、錳、鎂、硫等無機離子，因產生異色或渾濁而引起干擾，水中顏色和渾濁亦影響比色。為此需經絮凝沉澱過濾稱蒸餾預處理，易揮發的還原性干擾物質，還可在酸性條件下加熱以除去。對金屬離子的干擾，可加入適量的掩蔽劑加以消除。
(3)本方法的適用範圍本法最低檢出濃度為0.025mg/L(光度法)，測定上限為2 mg/L。採用目視比色法，最低檢出濃度為0.02 mg/L。水樣做適當的預處理後，本法可適用於地面水、地下水、工業廢水和生活污水。
2．儀器：氨氮快速測定儀
3.試劑配製試劑用水均應為無氟水。
(1)納氏試劑
可選擇下列一種方法製備。①稱取20g碘化鉀溶於25mL水中，邊攪拌邊分次加入少量二氯化汞(HgCl2)結晶粉末(約10g)，至出現朱紅色沉澱不易溶解時，改為滴加飽和二氯化汞溶液並充分攪拌，當出現少量朱紅色沉澱不再溶解時，停止滴加氯化汞溶液。另稱取60 g氫氧化鉀溶於水，並稀釋至250mL，冷卻至室溫後，將上述溶液再邊攪拌下，徐徐注入氫氧化鉀溶液中，用水稀釋至400mL，混勻。靜置過夜，將上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。②稱取16g氫氧化鈉，溶於50 mL水中，充分冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞(HgI2)溶於水，然後將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100 mL，貯於聚乙烯瓶中，密塞保存。
(2)石酸鉀鈉溶液稱50g酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)溶於100 mL水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100 mL。
(3)銨標準貯備溶液稱取3.819g經100℃乾燥過的氯化銨(NH4Cl)溶於水中，移入1000 mL容量瓶中，稀釋至標線。此溶液每毫升含1.00 mg氨氮。
(4)銨標準使用溶液稱取5.00mL銨標準貯備液於500mL容量瓶中，用水稀釋至標線。此溶液每毫升含0.010 mg氨氮。
4.步驟
(1)校準曲線的繪製吸取0mL、0.50 mL、1.00mL、3.00mL、5.00 mL、7.00 mL和10.00 mL銨標準使用液於50 mL比色管中，稀釋至標線，加1.0mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加1.5mL納氏試劑，混勻。放置10min後，在波長420nm處，用光程20mm比色皿，以水為參比，測量吸光度。由測得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度後，得到校正吸光度，繪製以氨氮含量(mg)對校正吸光度得核准曲線。
(2)水樣的測定①分取適量經絮凝沉澱預處理後得水樣(使氨氮含量不超過0.1 mg)，加入50mL比色管中。稀釋至標線，加1.0mL酒石酸鉀鈉溶液。②分取適量經蒸餾預處理後的餾出液，加入50mL比色管中，加一定量1mol/L氫氧化鈉以中和硼酸，稀釋至標線。加1.5mL納氏試劑，混勻。放置10min後，同標準曲線步驟測量吸光度。
(3)空白試驗以無氨水代替水樣，作全程式空白測定。
5.計算
由水樣測得的吸光度減去空白試驗得吸光度後，從校準曲線上查得氨氮含量(mg)。
氨氮(N，mg/L)= m/v×100
式中：m—由校準曲線查得的氨氮量(mg)；
v—水樣體積(mL)。
6.精密度和準確度三個實驗室分析含1.14-1.16mg/L氨氮得的加標水樣，單個實驗室的相對標準偏差不超過9.5%；加標回收率範圍為95%-104%。四個實驗室分析含1.81-3.06mg/L氨氮的加標水樣，單個實驗室的相對偏差不超過4.4%；加標回收率範圍94%-96%。
7.注意事項
(1)納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對顯色反應的靈敏度有較大影響。靜置後生成的沉澱應除去。
(2)濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無銨水洗滌。所用玻璃器皿應避免實驗室空氣中的氨的玷污。
