糖殘基即糖類物質水解之後得到的水解基團，一般由雙糖或多糖類物質水解得到。糖苷一般由殘基（糖殘基）和配基（非糖部分）組成，糖的殘基和配基之間的鍵稱為苷鍵。多糖類物質由多個單糖殘基以糖苷鍵連線形成的多聚物，例如直鏈澱粉和支鏈澱粉等。
基本介紹
- 中文名：糖殘基
- 外文名：Sugar residues
- 生成：糖類物質水解
- 糖苷組成：由殘基和配基組成
- 苷鍵：糖的殘基和配基之間的鍵
- 多糖類物質：例如直鏈澱粉和支鏈澱粉等
糖原,糖原中葡萄糖殘基的轉換,膠體金標記的外源凝集素反應示糖殘基,
糖原
糖原(glycogen)又稱肝糖，以顆粒形式存在於肝細胞(肝糖原)和肌肉(肌糖原)中。它是經一系列酶催化反應，將多個葡萄糖組合而成的分支多糖，其功能與植物的澱粉相似，所以又叫動物澱粉。糖原是動物的儲備多糖，當生物體一旦不能從外界獲得營養物質時，儲存糖原就可在酶的作用下，釋放出葡萄糖以供生物體能量消耗的需要。
糖原為無定形粉末，不溶於冷水，易溶於熱水，其水溶液遇碘顯棕紅色。糖原能被α一澱粉酶水解。與支鏈澱粉類似，糖原也是由α-D-葡萄糖通過α-1，4-苷鍵和α-1，6-苷鍵連線成的多糖。糖原分支程度更高，支鏈更多、更短，每隔8～10葡萄糖殘基就有一個支鏈，相對分子質量高達1×108。
糖原中葡萄糖殘基的轉換
糖原存在於如肝臟和骨髂肌這些組織內的微小顆粒中；這些顆粒也含有緊密結合的糖原磷酸化酶和糖原合成酶。肝糖原的葡萄糖殘基進行經常的非常快的轉換，因為大量的葡萄糖和其它己糖從小腸到達肝臟，在經過暫時地以糖原貯存後，又再以血糖的形式離開肝臟。並非糖原的高度分支結構的所有部份都以同樣的速率轉換。大多數葡萄糖殘基的轉換髮生在外周分支，而糖原的核心結構代謝較為穩定，其轉換速率很低。
膠體金標記的外源凝集素反應示糖殘基
1、原理
糖內的各種糖殘基具有與膠體金標記的外源凝集素(lectin)特異性結合的特性，因而糖殘基可得到顯示。本法是Roth(1983)建立，村田長芳(1985)改進的。
2、試劑配製
(1)磷酸緩衝等滲氯化鈉液(pH7.4) (PBS)：氯化鈉0.9g，溶於磷酸緩衝液100ml中。
(2)膠體金標記的外源凝集素溶液：按凝集素25～50μg/ml的濃度用PBS配製。外源凝集素的種類較多，伴刀豆球蛋白(Concanavalin A，Con A)、蓖麻凝集素(ricinus communis agglutinin—Ⅰ，RCA—Ⅰ)、花生凝集素(peanut agglutinin，PNA)、麥胚凝集素(wheat germ agglutinin，WGA)、荊豆凝集素(ulex europeus，UEA—Ⅰ)等。
3、步驟
(1)新鮮的小片組織(大小為0.5～1mm3左右)放入0.5%或1%戊二醛磷酸緩衝等滲氯化鈉溶液(pH7.4)，或者2%多聚甲醛(paraformaldehyde)PBS一0.1%戊二醛PBS等量混合液(pH7.4)，4℃乃至室溫下固定2～3h之後，必要時再入0.5%氯化銨PBS液中，室溫下作用2h，以封閉游離的醛基。組織片用LowicrylK4M進行低溫包埋，製作超薄切片，撈到貼有formvar支持膜的鎳網上。
(2)PBS洗5min。
(3)0.2%～1%牛血清白蛋白PBS溶液中處理5min。
(4)PBS充分洗。
(5)膠體金標記的外源凝集素溶液中，室溫下反應30～60min。
(6)PBS洗2次。各3～5min。
(7)蒸餾水洗。
(8)醋酸鈾染色5min。
(9)乙酸鉛染色2min。
(10)蒸餾水洗。
(11)鍍碳。
4、結果
α—D一甘露糖、α—D一葡萄糖(Con A)，β—D一半乳糖(RCA—Ⅰ)，N一乙醯一D一半乳糖胺(PNA)，N一乙醯一D一葡糖胺(WGA)，α—L一岩藻糖(UEA—Ⅰ)等的殘基上有膠體金粒子存在。對照為陰性
5、注意事項
(1)包埋用樹脂，Epon812也可以用，但糖殘基的檢出率極低，效果甚差。
(2)Lowicryl K4M對電子射線的抵抗力弱，步驟(11)鍍碳是為了增強其抵抗力。
(3)為確定本反應對各種糖殘基是否是特異的，應做必要的對照。其方法是在步驟(5)使用的膠體金標記外源凝集素溶液中，分別加入0.1～0.15mol/l。濃度的各自的單糖，然後進行(6)以下各步驟之後，其結果如反應變成陰性則可認為本法是特異的。
