等電點聚焦效應

等電點聚焦效應就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦於與其等電點相當的pH位置上,等電點聚焦聚焦的優點是:有很高的解析度可將等電點差0.02pH單位的蛋白質分開。

一般電泳由於受擴散作用的影響,隨著時間和所走的距離加長,區帶越走越寬,而電聚焦能抵消擴散作用,使區帶越走越窄;由於這種電聚焦作用,不管樣品加在什麼部位,都可聚焦到其電點,很稀的樣品也可進行分離;可直接測出蛋白質的等電點,其精確度可達0.01pH 單位。

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