《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》是對GB/T 5511—1985《糧食、油料檢驗粗蛋白質測定法》的修訂。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》與GB/T 5511—1985相比主要變化如下：增加了原理、規範性引用檔案、術語和定義、扦樣、試樣製備、含水量測定、精密度和測試報告。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》自實施日期起代替GB/T 5511—1985。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》的附錄A、附錄B和附錄C均為資料性附錄。
基本介紹
- 書名：穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法
- 作者：中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局 中國國家標準化管理委員會
- 出版日期：2008年11月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066134511
- 外文名：Cereals and Pulses-Determination of the Nitrogen Content and Calculation of the Crude Protein Content-Kjeldahl Method
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：11頁
- 開本：16
- 品牌：北京勁松建達科技圖書有限公司
內容簡介,文摘,
內容簡介
《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》由國家糧食局提出。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》由全國糧油標準化技術委員會歸口。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》起草單位：國家糧食局科學研究院。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》主要起草人：張佳欣、郝希成、吳春華。《穀物和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法(GB/T 5511-2008/ISO 20483:2006)》所替代標準的歷次版本發布情況為：GB/T 5511—1985。
文摘
著作權頁：
5.3 二氧化鈦（TiO2）。
5.4 硫酸（H2SO4）：c（H2SO4）=18 mol/L，ρ20（H2SO4）=1.84 g/mL。
5.5 石蠟油。
5.6 N－乙醯苯胺（C8H9NO）：熔點114℃，氮含量10.36 g/100 g。
5.7 色氨酸（C11 H12N2O2）：熔點282℃，氮含量13.72 g/100 g。
5.8 五氧化二磷（P2O5）。
5.9 硼酸：水溶液，ρ20（H3BO3）=40 g/L，或所使用儀器推薦的濃度。
5.10 指示劑：按照所使用儀器的推薦，加入一定體積的溶液A（5.10.1）和溶液B（5.10.2）（例如：5體積溶液A和1體積溶液B）。
注1：有可能準備使用的硼酸溶液中含有指示劑（5.9+5.10）。
注2：溶液A和溶液B的比例可根據儀器進行調整。
也可以使用pH電極進行電位滴定，pH電極需要每天校準。
5.10.1 溶液A：200 mg溴甲酚綠（C21H14Br4O5S）溶於體積分數為95%的乙醇（C2H5OH），配製成100 mL溶液。
5.10.2 溶液B：200 mg甲基紅（C15H15N3O2）溶於體積分數為95%的乙醇（C2H5OH），配製成100 mL，溶液。
5.11 氫氧化鈉水溶液（NaOH）：質量分數33%或40%，含氮量少於或等於0.001%。也可以使用含氮量少於或等於0.001%的工業級氫氧化鈉。
5.12 硫酸：標準滴定溶液，c（H2SO4）=0.05 mol/L。
因為硫酸在連線管中不產生氣泡，所以推薦用硫酸替代鹽酸。
5.13 硫酸銨：標準滴定溶液，c（NH4）2SO4=0.05 mol/L。
也可以選擇使用某一種鹽，例如（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O。
5.14 浮石：顆粒狀，鹽酸酸洗並灼燒。
5.15 蔗糖（可選擇）：不含氮。
6 儀器
6.1 機械研磨機。
6.2 篩子：孔徑0.8 mm。
6.3 分析天平：分度值為0.001 g。
6.4 消化、蒸餾和滴定儀器：
消化單元應確保溫度的均勻性。
通過使用兩種參考物質（5.6或5.7）中任意一種進行全過程測定來評估溫度的均勻性，並同時測定回收率。
蒸餾儀器也應通過進行已知量銨鹽的蒸餾（例如10 mL 硫酸銨溶液（5.13））和檢查回收率，回收率應大於或等於99.8%。
7 扦樣
實驗室接受的樣品應具有代表性，在運輸或儲藏過程中不應受損或改變。
本標準不規定扦樣方法，推薦ISO 6644和。ISO 13690給出的扦樣方法。
8 試樣製備
如果需要，樣品要進行研磨，使其完全通過0.8 mm孔徑的篩子。對於糧食，至少要研磨200 g樣品，研磨後的樣品要充分混勻。
9 水分測足
用本標準第8章製備的部分樣品測定水分（ωH）。測定水分的方法要適合測定對象（例如穀物和穀物製品按GB/T 21305測定；玉米按GB/T 10362測定。或者使用參考文獻（10）中描述的適合特殊種子的方法）。
10 操作步驟
10.1 通則
如果需要檢查是否滿足重複性限（12.2）的要求，可按照10.2到10.5的步驟進行兩次獨立的測定。
10.2 稱樣
依據預估含氮量稱量試樣（第8章），精確到0.001 g，使試樣的含氮量在0.005 g～0.2 g之間，最好大於0.02 g。
10.3 測定
10.3.1 消化
警告：下列操作應在通風良好，具有硫酸防護罩的條件下進行。
轉移試樣（10.2）到消解燒瓶，然後加入：
——10 g硫酸鉀（5.1）；
——0.30 g五水硫酸銅（5.2）；
——0.30 g二氧化鈦（5.3）（也可以使用符合規定成分的粒狀催化劑）；
——20 mL 硫酸（5.4）。
可根據儀器情況調整硫酸的加入量，但應確認此改進可以滿足對N－乙醯胺的回收率達到99.5%和對色氨酸的回收率達到99.0%。
小心混合以確保試樣的完全浸潤。將燒瓶置於預熱到420℃±10℃的消化單元。從消化單元溫度再次達到420℃±10℃時開始計時，至少消化2 h，然後取下自然冷卻。
註：建議加入浮石（5.14）作為沸騰調節器和加入如石蠟油（5.5）的消泡劑。
最短消化時間應使用參考物質進行檢驗，因為參考物質很難達到回收率的要求（見10.5）。
遵循設備製造商關於蒸汽排空的建議，因為過強的吸力可能導致氮的損失。
10.3.2 蒸餾
小心地向冷卻後的消解燒瓶中加入50 mL水，放冷至室溫。量取50 mL硼酸（5.9）到接收瓶中，無論是使用目測比色或光學探頭，均要向其中加至少10滴指示劑（5.10）。
連線好蒸餾裝置，向消解燒瓶中加入5 mL 過量的氫氧化鈉溶液完全中和所使用的硫酸，然後開始蒸餾。
根據儀器，所用的試劑量可以變化。
10.3.3 滴定
使用硫酸溶液（5.12）進行滴定，滴定既可以在蒸餾過程中進行，也可以在蒸餾結束後對所有蒸餾液進行滴定。滴定終點的確定可以使用目測比色、光學探頭或用pH計的電位分析判定。
10.4 空白試驗
使用10.3.1到10.3.3的試劑，不加試樣進行空白試驗。
註：可以用1 g蔗糖（5.15）代替試驗樣品。
10.5 參考物質測試（檢查試驗）
在五氧化二磷（5.8）的存在下，60℃～80℃真空乾燥參考物質。
進行檢查試驗，試樣的最小量根據N－乙醯胺或色氨酸的含氮量決定，至少0.15 g。
5.3 二氧化鈦（TiO2）。
5.4 硫酸（H2SO4）：c（H2SO4）=18 mol/L，ρ20（H2SO4）=1.84 g/mL。
5.5 石蠟油。
5.6 N－乙醯苯胺（C8H9NO）：熔點114℃，氮含量10.36 g/100 g。
5.7 色氨酸（C11 H12N2O2）：熔點282℃，氮含量13.72 g/100 g。
5.8 五氧化二磷（P2O5）。
5.9 硼酸：水溶液，ρ20（H3BO3）=40 g/L，或所使用儀器推薦的濃度。
5.10 指示劑：按照所使用儀器的推薦，加入一定體積的溶液A（5.10.1）和溶液B（5.10.2）（例如：5體積溶液A和1體積溶液B）。
注1：有可能準備使用的硼酸溶液中含有指示劑（5.9+5.10）。
注2：溶液A和溶液B的比例可根據儀器進行調整。
也可以使用pH電極進行電位滴定，pH電極需要每天校準。
5.10.1 溶液A：200 mg溴甲酚綠（C21H14Br4O5S）溶於體積分數為95%的乙醇（C2H5OH），配製成100 mL溶液。
5.10.2 溶液B：200 mg甲基紅（C15H15N3O2）溶於體積分數為95%的乙醇（C2H5OH），配製成100 mL，溶液。
5.11 氫氧化鈉水溶液（NaOH）：質量分數33%或40%，含氮量少於或等於0.001%。也可以使用含氮量少於或等於0.001%的工業級氫氧化鈉。
5.12 硫酸：標準滴定溶液，c（H2SO4）=0.05 mol/L。
因為硫酸在連線管中不產生氣泡，所以推薦用硫酸替代鹽酸。
5.13 硫酸銨：標準滴定溶液，c（NH4）2SO4=0.05 mol/L。
也可以選擇使用某一種鹽，例如（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O。
5.14 浮石：顆粒狀，鹽酸酸洗並灼燒。
5.15 蔗糖（可選擇）：不含氮。
6 儀器
6.1 機械研磨機。
6.2 篩子：孔徑0.8 mm。
6.3 分析天平：分度值為0.001 g。
6.4 消化、蒸餾和滴定儀器：
消化單元應確保溫度的均勻性。
通過使用兩種參考物質（5.6或5.7）中任意一種進行全過程測定來評估溫度的均勻性，並同時測定回收率。
蒸餾儀器也應通過進行已知量銨鹽的蒸餾（例如10 mL 硫酸銨溶液（5.13））和檢查回收率，回收率應大於或等於99.8%。
7 扦樣
實驗室接受的樣品應具有代表性，在運輸或儲藏過程中不應受損或改變。
本標準不規定扦樣方法，推薦ISO 6644和。ISO 13690給出的扦樣方法。
8 試樣製備
如果需要，樣品要進行研磨，使其完全通過0.8 mm孔徑的篩子。對於糧食，至少要研磨200 g樣品，研磨後的樣品要充分混勻。
9 水分測足
用本標準第8章製備的部分樣品測定水分（ωH）。測定水分的方法要適合測定對象（例如穀物和穀物製品按GB/T 21305測定；玉米按GB/T 10362測定。或者使用參考文獻（10）中描述的適合特殊種子的方法）。
10 操作步驟
10.1 通則
如果需要檢查是否滿足重複性限（12.2）的要求，可按照10.2到10.5的步驟進行兩次獨立的測定。
10.2 稱樣
依據預估含氮量稱量試樣（第8章），精確到0.001 g，使試樣的含氮量在0.005 g～0.2 g之間，最好大於0.02 g。
10.3 測定
10.3.1 消化
警告：下列操作應在通風良好，具有硫酸防護罩的條件下進行。
轉移試樣（10.2）到消解燒瓶，然後加入：
——10 g硫酸鉀（5.1）；
——0.30 g五水硫酸銅（5.2）；
——0.30 g二氧化鈦（5.3）（也可以使用符合規定成分的粒狀催化劑）；
——20 mL 硫酸（5.4）。
可根據儀器情況調整硫酸的加入量，但應確認此改進可以滿足對N－乙醯胺的回收率達到99.5%和對色氨酸的回收率達到99.0%。
小心混合以確保試樣的完全浸潤。將燒瓶置於預熱到420℃±10℃的消化單元。從消化單元溫度再次達到420℃±10℃時開始計時，至少消化2 h，然後取下自然冷卻。
註：建議加入浮石（5.14）作為沸騰調節器和加入如石蠟油（5.5）的消泡劑。
最短消化時間應使用參考物質進行檢驗，因為參考物質很難達到回收率的要求（見10.5）。
遵循設備製造商關於蒸汽排空的建議，因為過強的吸力可能導致氮的損失。
10.3.2 蒸餾
小心地向冷卻後的消解燒瓶中加入50 mL水，放冷至室溫。量取50 mL硼酸（5.9）到接收瓶中，無論是使用目測比色或光學探頭，均要向其中加至少10滴指示劑（5.10）。
連線好蒸餾裝置，向消解燒瓶中加入5 mL 過量的氫氧化鈉溶液完全中和所使用的硫酸，然後開始蒸餾。
根據儀器，所用的試劑量可以變化。
10.3.3 滴定
使用硫酸溶液（5.12）進行滴定，滴定既可以在蒸餾過程中進行，也可以在蒸餾結束後對所有蒸餾液進行滴定。滴定終點的確定可以使用目測比色、光學探頭或用pH計的電位分析判定。
10.4 空白試驗
使用10.3.1到10.3.3的試劑，不加試樣進行空白試驗。
註：可以用1 g蔗糖（5.15）代替試驗樣品。
10.5 參考物質測試（檢查試驗）
在五氧化二磷（5.8）的存在下，60℃～80℃真空乾燥參考物質。
進行檢查試驗，試樣的最小量根據N－乙醯胺或色氨酸的含氮量決定，至少0.15 g。
