凱式定氮儀

凱氏定氮儀是根據蛋白質中氮的含量恆定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量的儀器。因其蛋白質含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀,又名定氮儀、蛋白質測定儀、粗蛋白測定儀。這種方法是由凱耶達爾在1883年發明的。

簡介,原理,適用範圍及特點,套用,

簡介

凱氏定氮儀是根據蛋白質中氮的含量恆定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量的儀器。因其蛋白質含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀,又名定氮儀、蛋白質測定儀、粗蛋白測定儀。這種方法是由凱耶達爾在1883年發明的。

原理

將有機化合物與硫酸共熱使其中的氮轉化為硫酸銨。在這一步中,經常會向混合物中加入硫酸鉀來提高中間產物的沸點。樣本的分析過程的終點很好判斷,因為這時混合物會變得無色且透明(開始時很暗)在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉,然後蒸餾。這一步會將銨鹽轉化成氨。而總氨量(由樣本的含氮量直接決定)會由反滴定法確定:冷凝管的末端會浸在硼酸溶液中。氨會和酸反應,而過量的酸則會在甲基橙的指示下用碳酸鈉。滴定所得的結果乘以特定的轉換因子就可以得到結果。

適用範圍及特點

1、測定範圍:0.1mgN ~240mgN;
2、測定樣品量:固體≤ 5g/個,液體≤ 15ml/個;
3、回收率:≥99.5%;
4、重複性:≤ ±1%;
5、蒸餾速度:4 ~8分鐘/樣品;
6、程式自動控制:加鹼、加硼酸、稀釋和蒸餾;
7、冷卻水消耗:2L/分鐘;
8、電源:220V 50Hz;
9、功率:1200W;
10、外形尺寸:380*330*820
11、重量:24kg。

套用

凱氏定氮法的普遍適用性、精確性和可重複性已經得到了國際的廣泛認可。它已經被確定為檢測食品中蛋白質含量的標準方法。但是,這種方法並不能給出真實的蛋白質含量,因為所測定的氮可能不僅僅是由蛋白質轉化來的。這可以從2007年美國寵物食品污染事件和2008年中國毒奶粉事件等食品安全事件中被體現:三聚氰胺,一種含氮量較高的物質,被添加到了食品中以偽造較高的含氮量。另外,由於不同的胺基酸序列,這種方法也需要許多不同的校正因子。而且,凱氏定氮法還需要使用濃硫酸和較長時間的加熱(一般來講,大於1小時)。這也造成了在粗略測量蛋白質含量時,杜馬斯法有時更方便些。

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