疏水作用色譜法h川raphohir intert3tion rhromatoraphy使用適度疏水性的固定相，以含鹽的水溶液作為流動相，藉疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。
基本介紹
- 中文名：疏水作用色譜法
- 定義：分離生物大分子化合物的液相色譜法
疏水作用色譜法h川raphohir intert3tion rhromatoraphy使用適度疏水性的固定相，以含鹽的水溶液作為流動相，藉疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。
疏水作用色譜是指採用具有適度疏水性的填料，以含鹽水溶液作流動相，藉助於溶質與固定相間的疏水相互作用實現分離的色譜方法。疏水作用色譜保留機理與反相色譜基本相同，所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強，多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用於蛋白質的分離與純化。
疏水作用色譜法 疏水作用色譜法h川raphohir intert3tion rhromatoraphy使用適度疏水性的固定相，以含鹽的水溶液作為流動相，藉疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。
疏水色譜法，利用分離介質中固定的疏水配位體和被分離的蛋白質的疏水表面區域之間的相互作用來進行分離的一種色譜法。一般溶液的鹽濃度增加可使疏水吸附作用強度增大,故常在高鹽濃度下實現蛋白質的吸附,而用低濃度的氯化鈉或適當的緩衝液和水來進行洗脫。由於該法的條件相當溫和,非常適合於一些不穩定蛋白質以及膜蛋白...
反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質也通過疏水性相互作用分配於固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈...
在反相色譜法中共價結合到載體上的固定相是一些直鏈碳氫化合物，如正辛基等。流動相的極性比固定相的極性強。反相色譜法在高效液相色譜法中套用最廣泛。 在反相色譜法中，使溶質滯留的主要作用是疏水作用，在高效液相色譜中又被稱為疏溶劑作用。所謂疏水作用即當水中存在非極性溶質時，溶質分子之間的相互作用 、溶質...
反相色譜法是以表面非極性載體為固定相，以比固定相極性強的溶劑為流動相的一種液相色譜分離模式．反相色譜固定相大多是矽膠表面鍵合疏水基團，基於樣品中的不同組分和疏水基團之間疏水作用的不同而分離．在生物大分子分離中，多採用離子強度較低的酸性水溶液，添加一定量乙腈、異內醇或甲醇等與水互溶的有機溶劑作...
1952年，Martin和James發表第一篇氣液色譜論文，首次用氣體作流動相，配合微量酸鹼滴定，發明了氣相色譜，它給揮發性化合物的分離測定帶來了劃時代的革命。層析法的原理 層析法利用混合物中各組分的物理化學性質間的差異（溶解度、分子極性、分子大小、分子形狀、吸附能力、分子親合力等），使各組分在支持物上集中分布...
鍵合烷基的疏水性隨碳鏈的延長而增加，溶質的k也增大。矽膠表面鍵合烷基的濃度越大，則溶質的k越大。3、流動相 極性越強，洗脫能力越弱，使溶質的k越大；溶劑種類：水為弱溶劑，醇為強溶劑；溶劑比例：水的比例增加，使k增大。套用示例 近十年來，高效液相色譜在蛋白質分離純化方面取得了很大的進展，並得到了...
其優點是對蛋白質的吸附容量較大（10～100mg/cm），並可重複使用，效果不變，但其使用有局限性，所能達到的解析度也不高。疏水層析的條件 ① 對疏水吸附劑的選擇根據樣品特點和實驗目的選擇合適的疏水吸附劑。用一組柱，如Seph-Cn（n=1-10），層析樣品，看樣品的吸附情況。隨著碳鏈的增長，蛋白質吸附量也增加...
色譜分析（層析）有各種類型。按照固定相使用的形式，可分為柱層析、紙層析、薄層層析。按照溶質的展開方式，可分為前沿層析、置換層析、洗脫層析。按照流動相的物理狀態，可分為氣相層析與液相層析，以及超臨界流體層析等。按照分離機理，可分為分配層析、吸附層析、離子交換層析、排阻層析、疏水層析、離子對層析、親和...
第4類：基於形成非對映體的金屬絡合物，是由Davankov開發的手性分離技術，也稱為手性配位交換色譜（CLEC）。第5類：蛋白質型手性色譜柱。手性分離是基於疏水相互作用和極性相互作用實現。但是，隨著由於市場上可選擇的手性色譜柱越來越多，此分類系統有時很難將一些手性柱歸納進去。因此參考Irving Wainer的分類方法，...
第六章 疏水作用鍵合相色譜法 第一節 疏水作用液相色譜的分離原理 211 一、蛋白質結構特點 212 二、疏水作用機理 212 三、兩親作用色譜 213 第二節 固定相 214 一、固定相載體 214 二、疏水配位體 215 第三節 流動相 215 一、流動相的組成 215 二、影響HIC分離選擇性的因素 216 第四節 疏水作用色譜...
膠束色譜的特點 膠束色譜與傳統液相色譜最大的區別在於膠囊流動相為一微觀非均相體系—由膠束及其周圍溶劑介質組成; 而常規流動相則是一均相體系。這就使得膠束色譜具有與傳統液相色譜不同的如下獨特點和局限性。高度的選擇性 膠束色譜中, 分離組分與膠束間存在著靜電、疏水及空間效應的綜合作用。具有傳統液相色譜所不...
凡是在溶劑中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。離子對 (Ion Pair Chromatography)離子對色譜法是將一種 ( 或多種 ) 與溶質分子電荷相反的離子 ( 稱為對離子或反離子 ) 加到流動相或固定相中，使其與溶質離子結合形成疏水型離子對化合物，從而控制溶質離子的保留行為。其原 理可用下式表示：...
當反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時，有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或完全不保留的現象，這就是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。碳長鏈(常見的有C18，C8等)在有機相中是呈舒展的毛刷狀的，被測物色譜保留的作用力主要是和非級性的烷基長鏈的作用，所以含碳量高即...
《生物大分子的液相色譜分離和製備第二版》由科學出版社於1993年3月1日出版。內容介紹 本書較為系統而詳細地論述了生物大分子的液相色譜分離和製備。內容包括液相色譜的基本原理和參數，頂替色譜、離子交換色譜、體積排阻色譜、反相色譜、疏水作用色譜、親合色譜、中低壓製備色譜、灌注色譜、蛋白質製備色譜的分離和設計...
它既有普通液相層析的功能（可在常溫下分離製備水溶性的物質），又有氣相色譜的特點（即高壓，高速，高解析度和高靈敏度）；它不僅適應於很多不易揮發，難熱分解物質的定性和定量分析，而且也適用於上述物質的製備和分離。高效液相色譜按其固定相的性質可分為高效凝膠色譜，疏水性高效液相色譜，反相高效液相色譜高效...
烷基鍵合固定相對每種溶質分子締合作用和解締作用能力之差，就決定了溶質分子在色譜過程的保留值。以下簡述影響溶質保留值的三個因素:1、溶質分子結構 在反相鍵合相色譜法中，溶質的分離是以它們的疏水結構差異為依據的，溶質的極性越弱，疏水性也強，保留值越大。根據疏溶劑理論，溶質的保留值與其分子中非極性部分的...
由於陽離子和陰離子交換劑排阻離子，使快速通過色譜柱，無保留或保留值很小；而非離子性溶質被分布、保留並實現分離。其保留基於溶質分子與交換劑之間范德華力、偶極、疏水作用等。有機酸同系物保留值隨碳數增加；具相同碳數長鏈脂肪酸保留值隨羧基增加而降低；芳環衍生物比同碳數脂肪族化合物保留值要高 簡介 排阻...
④載體需具有離度的親水性及水不溶性，載體的親水性能夠在一定程度上保證被免疫親和吸附的生物分子的穩定性，還可有效減少因疏水作用等其他作用造成的非特異性吸附，保證親和反應平衡。抗原或抗體與載體的結合 抗原或抗體要偶聯到載體上，需要先將載體的功能基困活化，再進行偶聯。偶聯反應必須在不致使破壞取基的理化...
疏水相互作用可以利用傳統的熱力學解釋。圍繞非極性基團的水分子，相對溶液中其他地方的水分子來說更有序，形成一個封閉結構，或稱為“籠形”結構。水分子彼此之間形成氫鍵，而且只是很脆弱地結合在封閉結構內的基團上。當發生疏水相互作用時，水分子排列有序形成的“籠形”結構被破壞，這部分水進入自由水中，使水...
據統計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%。高效液相色譜按其固定相的性質可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相...
近年來, 在分配色譜 基 礎 上 又 發 展 出 了 新 分 支 如 親 水 作 用 色 譜(hydrophilic interaction liquid chromatography, HILIC)和疏水作用色譜等。HILIC 作為正相色譜的一種變化形式, 但使用親水型固定相、水及與水相溶的有機溶劑則做為流動相, 其套用有增加趨勢, 其優勢主要體現在特別適合於高...
離子對色譜 離子對色譜的固定相為疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基矽膠(ODS)，也有用C8矽膠或CN，固定相流動相由含有所謂對離子試劑和含適量有機溶劑的水溶液組成，對離子是指其電荷與待測離子相反，並能與之生成疏水性離子，對化合物的表面活性劑離子，用於陰離子分離的對離子是烷基胺類如氫...
第八節 疏水作用色譜181 一、疏水作用色譜的概念181 二、疏水作用色譜的分離原理181 三、疏水作用色譜的固定相181 四、影響疏水作用色譜的色譜條件182 第九節 膠束液相色譜182 一、膠束液相色譜的概念182 二、膠束液相色譜的分離機理183 三、膠束液相色譜所用的表面活化劑183 四、膠束液相色譜的套用184 第十節 ...
MKF疏水 MKF疏水性相互作用色譜柱填料的表面具有弱疏水性特徵。RPC方法是基於強疏水性作用，而疏水性相互作用色譜（HIC: hydrophobic interaction chromatography）方法則依賴於溶質與填料表面之間弱的疏水性相互作用。在高離子強度的鹽水溶液淋洗條件下，蛋白質分子中的疏水性部分與填料表面產生疏水性相互作用而被吸附，當...
773紙色譜操作方法164 78薄層色譜法166 781薄層色譜法的特點166 782薄層色譜法的操作167 79高壓液相色譜169 791高壓液相色譜分離方法的原理169 792製備性高壓液相色譜170 710蛋白質分離常用的色譜法171 7101免疫親和色譜法171 7102疏水作用色譜法172 7103金屬...
間隔臂過短起不到減小空間位阻的作用，而過長又可能通過彎曲封閉膜上的相鄰的活性位。載體 在親和膜分離技術中，分離膜即為配基和間隔臂的載體，其特異性是影響親和吸附總效率的重要因素之一。理想的載體應具有高度特異性（表面電荷總量接近為零）、高度親水性（無疏水作用位點）、足夠多可利用的化學基團、適當的表...
膠束電動毛細管色譜MECC 以膠束為假固定相的一種電動色譜 在電泳緩衝溶液中加入表面活性劑，當溶液中表面活性劑濃度超過臨界膠束濃度時，表面活性劑中的疏水基團可形成膠束，溶質因淌度和分配係數的不同而分離。1. 膠束假固定相 表面活性劑：親水基+疏水基 疏水基：直鏈或支鏈烷烴 親水基：陽離子、陰離子、兩性離子...