核酸適配體篩選進程監測及機理研究

《核酸適配體篩選進程監測及機理研究》是依託中國科學技術大學,由羅昭鋒擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:核酸適配體篩選進程監測及機理研究
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:羅昭鋒
  • 依託單位:中國科學技術大學
  • 負責人職稱:高級實驗師
  • 批准號:31570755
  • 研究期限:2016-01-01 至 2019-12-31
  • 申請代碼:C0502
  • 支持經費:62(萬元)
中文摘要
核酸適配體(aptamer)是一類能識別特定靶分子的單鏈DNA或RNA,可以通過體外篩選獲得。目前篩選適配體的方法仍存在許多問題,許多顯性和隱性的影響因素尚不明確。篩選實驗由於缺乏系統的理論指導,導致新適配體的發現和套用受到限制。本項目將通過以下途徑來研究篩選過程中的關鍵因素。首先利用FCE-SELEX技術、質譜技術、超微量螢光樣品的加熱電洗脫技術,建立幾種高靈敏的篩選進程監測方法;在此基礎上,通過比較乳濁液PCR和常規PCR擴增對篩選的影響;研究篩選文庫的條件依賴摺疊過程,明確各種因素對適配體和靶標結合的影響;建立有效的文庫變復性方法,確保篩選進程中複合物的正確形成,從而提高現有篩選體系的效率;篩選3-5種重要蛋白質的適配體,並驗證相關的篩選理論。以上研究成果將會系統揭示篩選過程中各種顯性和隱性因素對篩選成敗的影響,為適配體的篩選提供重要的技術支持和理論指導,促進新適配體的發現和套用。

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