《可用於活細胞的免標記核酸適配體感測器的構建》是依託蘭州大學，由楊曉娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：可用於活細胞的免標記核酸適配體感測器的構建
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：楊曉娟
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
活細胞的實時動態檢測對生命科學研究非常重要。因此本項目計畫構建可進入活細胞的免標記核酸適配體螢光感測器。首先，利用SELEX技術篩選對稀土離子Tb3+(Eu3+)螢光起開關作用的RNA適配體，然後將其與待測物適配體通過連線子組裝為組合式適配體感測器（MAS），靶分子不存在時，MAS不與Tb3+(Eu3+)結合，無螢光；當靶分子出現時，誘導MAS結構發生變化，與Tb3+(Eu3+)結合發光。最後利用分子克隆技術將MAS轉化進入活細胞內，並利用時間分辨螢光技術對靶分子進行檢測。結合稀土離子的特殊螢光性質和適配體的靶分子範圍廣的優點，最終實現活細胞內多種代謝物的原位實時檢測，克服目前活細胞檢測所遇到的螢光背景高，可檢測物質有限等問題，更好地認識細胞結構和功能、生命活動規律和本質。
結題摘要
確立了可行的篩選Eu3+螢光開關的適配體的方法，了解到巰基化合物加入G-四鏈體過氧化物酶體系中可以實現對特定單鏈核苷酸序列的氧化，排除了適配體Trp3a-1對L-Trp的保護作用。已經將喹啉酮-二乙基三胺五乙酸-乙二胺-3-馬來醯亞胺基苯甲醯標記在適配體Trp3a-1的末端。在本研究中，探明了甘草多糖（GPS）的提取動力學，並對GPS的理化特性和抗病毒活性進行了評價
