基本介紹
- 中文名：核酸分子雜交
- 外文名：nucleic hybridization
- 性質：實驗技術
- 研究對象：核酸
- 特點：高度特異性的
- 監測：特異性的靶序列檢測
簡介,雜交的雙方,探針,套用,
簡介
雜交過程是高度特異性的，可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。其基本原理就是套用核酸分子的變性和復性的性質，使來源不同的DNA（或RNA）片段，按鹼基互補關係形成雜交雙鏈分子（heteroduplex）。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間，也可在RNA與DNA鏈之間形成。使雙螺旋解開成為單鏈，因此，變性技術也是核酸雜交的一個環節。
雜交的雙方
雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA，也可以是細胞總DNA或總RNA。根據使用的方法被檢測的核酸可以是提純的，也可以在細胞內雜交，即細胞原位雜交。探針必須經過標記，以便示蹤和檢測。使用最普遍的探針標記物是同位素，但由於同位素的安全性，近年來發展了許多非同位素標記探針的方法。
探針
若雜交的目的是識別靶DNA中的特異核苷酸序列，這需要牽涉到另一項核酸操作的基本技術─探針（probe）的製備。探針是指帶有某些標記物（如放射性同位素32P，螢光物質異硫氰酸螢光素等）的特異性核酸序列片段。若我們設法使一個核酸序列帶上32P，那么它與靶序列互補形成的雜交雙鏈，就會帶有放射性。以適當方法接受來自雜交鏈的放射信號，即可對靶序列DNA的存在及其分子大小加以鑑別。在現代分子生物學實驗中，探針的製備和使用是與分子雜交相輔相成的技術手段。核酸分子雜交作為一項基本技術，已套用於核酸結構與功能研究的各個方面。
套用
核酸分子雜交作為一項基本技術，已套用於核酸結構與功能研究的各個方面。核酸分子雜交具有很高的靈敏度和高度的特異性，因而該技術在分子生物學領域中已廣泛地使用於克隆基因的篩選、酶切圖譜的製作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學領域中具有廣泛地套用，而且在臨床診斷上的套用也日趨增多。
在醫學上，目前已用於多種遺傳性疾病的基因診斷（gene diagnosis），惡性腫瘤的基因分析，傳染病病原體的檢測等領域中，其成果大大促進了現代醫學的進步和發展。
基因工程第三步目的基因的鑑定中
1.鑑定目的基因是否整合到染色體DNA上：DNA-DNA分子雜交
2.鑑定目的基因是否準確表達蛋白質：RNA-DNA分子雜交或抗原-抗體雜交。
註：其中DNA-DNA分子雜交與RNA-DNA分子雜交屬於核酸分子雜交。
