分子雜交方法

分子雜交方法是通過測定兩種核酸分子間的互補性，來判斷待測樣品與已知樣品同源程度的方法。一般過程是先標記探針或待測樣品DNA，變性後再與已吸附在濾膜上的待測樣品或已知的變性核酸分子進行雜交。洗去不能雜交的分子後，用放射自顯影法測定標記分子被吸附的程度，從而確定待測樣品中是否有所需的DNA片段。目前有三種常用方法。①菌落原位雜交法：將菌直接培養在濾膜上，經裂解菌體，使DNA變性並吸附在濾膜上，再與標記了的核酸分子進行雜交。

該法靈敏，特異性強，適用於篩選無選擇性標記的基因克隆。②Southern吸印法：1975年由E.Southern建立的一種DNA轉移法。先將待測DNA降解物用瓊脂糖凝膠電泳法進行分離，再對凝膠中的DNA進行變性處理並轉移到濾膜上，然後與探針進行雜交。可用來定位克隆DNA中的特異序列或鑑定細胞總DNA降解物中的特異序列。③Northern吸印法：是將變性RNA進行電泳分離，然後吸印在濾膜上，再與標記的DNA探針進行雜交。可用於對RNA的cDNA克隆的篩選鑑定。