核酸的分子雜交

核酸的分子雜交是定性或定量檢測特異RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的鹼基互補原則而發展起來的。在鹼性環境中加熱或加入變性劑等條件下,雙鏈DNA之間的氫鍵被破壞(變性),雙鏈解開成兩條單鏈。這時加入異源的DNA或RNA(單鏈)並在一定離子強度和溫度下保溫(復性),若異源DNA或RNA之間的某些區域有互補的鹼基序列,則在復性時可形成雜交的核酸分子。

基本介紹

  • 名稱:核酸的分子雜交
  • 所屬分類:DNA
臨床意義,注意事項,檢查過程,

臨床意義

針對白領族長期緊張工作狀態引起的脂肪肝、肥胖症、高血脂、心血管病等慢性病進行健康篩查,及早發現潛在的危害健康危險因素,同時提出全面健康改善方案 異常結果: 各種病原微生物感染導致的病症以及各種不健康症狀。
需要檢查的人群:有各種病原微生物感染者、腫瘤或者癌症患者。

注意事項

不合宜人群: 沒有 檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個人衛生。 檢查時要求:積極配合醫生。

檢查過程

(1) rRNA-DNA雜交:變性rRNA與變性DNA混合時,rRNA與其互補的DNA鏈形成雜交雙鏈,rRNA分子與異源DNA雜交時,也能在其同源區形成互補雙鏈,這種雜交雙鏈的穩定性與其同源性成正相關,適於細菌屬及屬上水平的分類研究。現最常用的是硝酸纖維膜結合法。
(2) 核酸探針技術 套用核酸探針技術檢測病原微生物核酸是臨床診斷學的重大發展,其原理是用帶有酶、化學螢光物、放射性核素或生物素標記的已知序列特定DNA片段(稱為探針),在一定條件下,按鹼基互補原則探針與待測標本中的核酸雜交,通過對雜交信號的檢測,從而鑑定標本中有無相應的病原微生物基因及其分子大小。常用核酸探針技術有固相雜交(斑點雜交、原位雜交、Southern印跡、Northern印跡等。)和液相雜交技術。 核酸探針適用於直接檢出臨床標本中的病原微生物,不受非病原微生物的影響,因此對某些尚不能分離培養或很難分離培養的微生物的檢測具有重要的意義。隨著探針標記的不斷改進,檢測試劑盒商品化,操作更簡便易行。

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