《探索Wnt/beta-catenin信號通路在蛋白尿腎病中的雙相雙重作用》是依託香港大學深圳研究院，由鄧智偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：探索Wnt/beta-catenin信號通路在蛋白尿腎病中的雙相雙重作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄧智偉
- 依託單位：香港大學深圳研究院
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Wnt/beta-catenin信號通路是腎臟損傷修復和纖維化的關鍵通路，但其在蛋白尿腎病中的作用仍未闡明。我們發現蛋白超載可引起近端腎小管上皮細胞（PTECs）的beta-catenin表達出現先上升再下降的變化。beta-catenin可能對急性腎損傷有保護作用，而在慢性腎損傷中卻促進纖維化的形成而影響修復。我們將首先在體外模型中，研究蛋白超載對PTECs的Wnt/beta-catenin信號通路表達模式及轉錄活性的影響以及激活此信號通路對蛋白超載引起的PTECs凋亡及纖維化作用。其次將通過條件激活小鼠特異性激活PTECs的Wnt/beta-catenin信號通路，研究其在蛋白超載誘導的急慢性腎損傷動物模型中的雙相雙重作用。本研究將首次全面闡明蛋白尿腎病發生髮展過程中Wnt/beta-catenin信號通路的作用機制，有可能為臨床治療蛋白尿腎病提供嶄新的策略。
結題摘要
蛋白尿是慢性腎病的重要特徵及預後指標，目前仍無有效治療手段。經典Wnt/β-catenin信號通路是參與腎臟病理生理損傷的關鍵信號通路，但是其在蛋白尿腎病中的作用仍未闡明。本研究於體外培養人近端小管上皮細胞系HK-2細胞，並使用人血白蛋白（human serum albumin, HSA）刺激HK-2細胞構建體外蛋白超載模型，藉助基因沉默等實驗技術手段深入探討了Wnt/β-catenin信號通路在HSA刺激下HK-2細胞內的活性，及其對HK-2細胞凋亡的影響和作用機制；同時，本研究還藉助Cre-loxP系統首次成功構建了近端腎小管上皮細胞（proximal tubule epithelial cell, PTEC）β-catenin條件性基因激活小鼠，即Tubcat小鼠（Ksp-CreERT2-Catnblox(ex3)/wt, Tubcat mouse），並以此轉基因小鼠和野生型小鼠為基礎，通過構建單側腎切除術聯合腹腔注射小牛血清白蛋白誘導的蛋白尿腎病小鼠模型，深入探討了PTEC內持續活化的Wnt/β-catenin信號通路對蛋白尿腎病腎組織結構和功能的影響及其作用機制。我們的研究結果顯示：（1）Wnt/β-catenin信號通路在蛋白尿腎病腎皮質內和HSA刺激下的HK-2細胞內呈現動態改變。在蛋白尿腎病和HSA刺激的早期，腎皮質和HK-2細胞內的Wnt/β-catenin信號通路出現顯著激活，活化的Wnt/β-catenin信號通路能夠促進腎臟炎症反應從而加重蛋白尿腎病腎臟結構和功能損害；在蛋白尿腎病和HSA刺激的晚期，腎皮質和HK-2細胞內Wnt/β-catenin信號通路出現顯著受抑，失活的Wnt/β-catenin信號通路能夠加重PTEC的凋亡並促進蛋白尿腎病腎臟結構和功能損害；（2）在蛋白尿腎病和HSA刺激的晚期，Dickkopf-3（Dkk-3）在腎皮質和HK-2細胞內顯著升高，使用重組Dkk-3刺激HK-2細胞可以抑制Wnt/β-catenin信號通路的活性。本項目通過分子、細胞和動物模型三個層次的交叉滲透研究深入闡明了經典Wnt/β-catenin信號通路在蛋白尿腎病不同時期中的作用和機制，為尋找蛋白尿腎病新型治療方法提供了理論依據。
