抗體示蹤技術

抗體示蹤技術,利用抗體來檢測、鑑定、追蹤抗原的生物學技術。

基本介紹

  • 中文名:抗體示蹤技術
  • 所屬學科:生物學
解釋,套用,

解釋

抗原(病原微生物、異體蛋白等)可誘發機體產生相應的抗體,這些抗體就成為機體抵禦外來侵犯的有力武器。抗體與抗原的結合具有高度的特異性,因此,人們又可利用抗體來檢測、鑑定、追蹤抗原。
抗體示蹤技術主要包括兩個技術環節:
①製備高特異性、高親和力的抗體;
②將看不見的抗原–抗體反應轉變為可記錄、可觀察的圖像或數據結果。抗體的製備 是抗體示蹤技術的基礎,為了保證示蹤的準確性,要求抗體具有高度的特異性;為了提高示蹤的靈敏度,要求抗體具有高度的親和力。製備抗體採用免疫學及細胞生物學的方法,可製備多克隆抗體,也可製備單克隆抗體。多克隆抗體的製備方法是:將目的抗原與佐劑混合,注射至動物(如兔、羊、馬等)體內,經過幾次加強免疫後,取動物的血,待其凝固後分離血清,血清中就含有大量針對目的抗原的抗體。單克隆抗體的製備比較複雜,要通過細胞雜交的方法,經過免疫動物、細胞融合、檢測篩選、陽性細胞的克隆化培養、抗體的鑑定、抗體的生產等一系列步驟,最終獲得大量均一的抗體。一般來說,多克隆抗體的親和力較高,但有時特異性不夠;而單克隆抗體的特異性較強,但有時親和力略低。在抗體示蹤技術中有時同時使用這兩種抗體,達到優勢互補的最佳效果。
抗原–抗體反應的記錄和觀察 
是抗體示蹤技術必須解決的關鍵問題。採用的方法很多,總體而言是將抗體標記上一種物質,一方面藉助這種物質轉換為其他方式來間接觀察記錄抗原抗體反應,另一方面也在轉換的過程中放大了反應結果。
常用的標記物有:酶,可催化某種有顏色變化的化學反應;螢光物質,在螢光顯微鏡下可被觀察;標記放射性同位素,其產生的射線可通過儀器(如γ–計數儀)記錄核子乳膠片感光並在顯微鏡下觀察感光的銀顆粒在細胞內的定位;膠體金,膠體金溶液本身有顏色可進行肉眼觀察或在電子顯微鏡下觀察金顆粒。

套用

抗體示蹤技術在醫學、生物學領域均得到廣泛的套用,其靈敏度和特異性都達到了很高的水平。
在臨床套用方面,各種酶聯免疫診斷試劑、放射免疫診斷試劑、免疫螢光診斷試劑發揮著巨大的作用,可檢測許多與疾病相關的特異性蛋白及病原微生物;而在基礎研究方面,酶聯免疫分析、免疫細胞化學、免疫電鏡、蛋白質電泳雜交等許多方法幫助科學工作者了解各種各樣的蛋白質(抗原)所在的部位(何種細胞或細胞器)、含量和作用等。

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