《抗腫瘤候選活性化合物L029作用機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由楊曉明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：抗腫瘤候選活性化合物L029作用機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊曉明
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
受體型酪氨酸激酶是國際公認的抗腫瘤靶點。c-Met及TrkA激酶分別為肝細胞生長因子HGF和神經生長因子NGF的受體，兩者的異常活化均與腫瘤的發生、發展密切相關，並且兩者介導的信號通路存在內在交聯。本實驗室前期利用抗腫瘤化合物高通量篩選模型，對兩千種化合物進行篩選，獲得一種新結構的抗腫瘤先導化合物L029（已申請中國發明專利）。體內外研究表明L029具有明確的抗腫瘤活性,對其作用機制初步研究表明L029發揮抗腫瘤作用可能通過特異抑制c-Met與Trk通路來進行的。本項目擬深入研究L029對c-Met、Trk信號通路的抑制活性及作用特徵，評估L029對c-Met、Trk共異常惡性細胞的作用及特點，以及以L029為分子探針，研究c-Met、Trk信號途徑的交聯及分子基礎。本研究將有助於確認L029是否作為抗腫瘤先導化合物及其作用基礎,為開發新型靶向抗腫瘤藥物提供新思路。
結題摘要
受體型酪氨酸激酶是國際公認的抗腫瘤靶點。c-Met及TrkA激酶分別為HGF和NGF的受體，兩者的異常活化均與腫瘤發生、發展密切相關。本實驗室前期獲得一種新結構的抗腫瘤先導化合物L029，可特異抑制c-Met與Trk介導的信號通路。本研究系統評價了Met與Trk調控肝癌惡性表型的作用，並深入研究了L029對c-Met、Trk信號通路的抑制活性及作用特徵。 首先，我們檢測了多種腫瘤細胞中c-Met與Trk的表達情況，並分析了肝癌病人術後生存期，結果發現兩者在肝癌病人中異常高表達，並且兩者共同高表達的病人預後更差，提示兩者共同高表達調控了肝癌惡性表型。敲低c-Met或TrkB可使肝癌細胞的增殖受到抑制，侵襲能力削弱；同時敲低兩者抑制作用更加明顯。利用c-Met和Trk激酶的特異性抑制劑得到相似結果。此外，我們還發現敲低c-Met可導致Trk激通路活化受到抑制；反之，敲低Trk也抑制了c-Met信號通路的活化，這些結果表明兩種激酶介導的信號通路之間存在相互交聯作用，同時靶向Met與Trk是治療肝癌的有效策略。 其次，我們進一步研究了L029對Trk信號通路的影響，結果發現L029可抑制NGF誘導的TrkA及BDNF誘導的TrkB磷酸化及下游信號通路的活化，抑制NGF及BDNF誘導的肝癌細胞侵襲，抑制TrkA轉化的NIH3T3細胞增殖及信號通路活化，在體內皮下荷瘤實驗中可顯著抑制Trk與Met的磷酸化。在肝癌細胞內敲低Met與Trk可顯著減弱L029抑制腫瘤細胞增殖的效果。表明L029作為一種選擇性的Met與Trk激酶抑制劑，在體外、體內具有明顯的抗肝癌細胞活性，可作為抗腫瘤先導化合物。 第三，前期研究我們發現L029原料藥的水溶性較差，口服給藥很難吸收，經過篩選我們獲得L029包合物處方。我們採用肝臟原位接種模型評價了L029體內抗腫瘤活性，發現口服L029包合物對肝臟原位腫瘤具有良好的治療效果，活性優於陽性對照藥物，表明L029具備開發為抗腫瘤藥物的潛力。 第四，我們對L029包合物在小鼠體內的生物利用度進行了測定，並初步分析了L029在組織中的分布。 綜上，本研究揭示了靶向Met與Trk是抗肝癌治療的有效途徑，小分子化合物可作為新型抗腫瘤先導化合物開展進一步的研究。
