《黑老虎中抗腫瘤化學成分與作用機制研究》是依託蘇州大學，由李賀然擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：黑老虎中抗腫瘤化學成分與作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李賀然
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
黑老虎（Kadsura coccinea）為五味子科南五味子屬植物。我們的初期實驗顯示，氯仿及乙酸乙酯部分均顯示一定的抗腫瘤活性。通過對氯仿萃取物的系統分離，我們發現了結構獨特的含有17(20)-ene部分結構的羊毛甾烷類化合物，以及黑老虎特有的含6,9-氧橋的聯苯環辛烯木脂素。利用新穎的非洲蟾蜍受精卵動物極細胞分裂抑制模型，結合體外抗腫瘤活性篩選，含有17(20)-ene部分結構的羊毛甾烷類化合物表現了較強的動物極細胞分裂抑制活性，及潛在的抗人癌細胞A549活性。本項目擬在此研究基礎上，利用已建立的篩選模型，進一步結合體內抗腫瘤活性篩選，有目的的從具有活性的乙酸乙酯萃取物中分離並鑑定含有17(20)-ene部分結構的羊毛甾烷類化合物以及含6,9-氧橋的聯苯環辛烯木脂素。通過考察其抗腫瘤活性數據及其作用機理，總結初步的構效關係。以期從黑老虎中尋找出結構新穎，機制明確的抗腫瘤先導化合物。
結題摘要
採用多種色譜技術進行分離純化，綜合運用現代波譜學技術(UV, IR, CD, MS和NMR)我們從黑老虎80%丙酮提取物的氯仿及乙酸乙酯萃取液中，分離並鑑定得到了63個化合物，包括2個脂肪酸類化合物，3個甾體類化合物，19個三萜類化合物，35個木酯素類化合物，以及4個其他類型化合物。其中10個新化合物。對乙酸乙酯提取物及相關化合物進行了動物極細胞分裂抑制活性及體外抗腫瘤活性篩選，考察了17(20)-ene結構在其抗腫瘤作用機制和構效關係。首次發現並鑑定了新的具有S-聯苯結構的6,9-氧橋聯苯環辛烯木脂素類化合物，並通過HPLC-CD方法確認了化合物的立體構型。進行了6,9-氧橋聯苯環辛烯木脂素的在不同溶劑中的動力學研究，考察了其在不同溶劑中的穩定性。對6,9-氧橋聯苯環辛烯木脂素類化合物CD 譜的特徵性規律進行了總結。培養並畢業了2名碩士研究生，發表了SCI文章一篇，國核心心期刊一篇，發表了國內一般刊物一篇。申請了三項發明專利，一項已經獲得授權通知。研究結果表明含有17(20)-ene結構的羊毛甾烷三萜類化合物Kadsuracoccinic acid A（20）, Kadsuracoccinic acid A methyl ester （21）和Kadsuracoccinic acid A dimethyl esters （22）顯示了較強的抗非洲蟾蜍極細胞分裂活性，並且呈劑量依賴性。化合物20,21和22的IC50 分別為0.68 μM，2.5 μM 和42.1 μM。構效分析表明，17位側鏈是起到抑制非洲蟾蜍極細胞分裂活性的必須官能團。並且，羧基是化合物具有抑制非洲蟾蜍極細胞分裂的必要官能團。在體外抗腫瘤實驗中，化合物20,21,22及18顯示了對A549人肺癌細胞有較強的抑制作用，IC50 分別為是1.2 μM，32.1 μM，50.5 μM和12.2 μM。木質素類化合物均顯示了較弱的細胞毒活性，化合物31，39顯示了對B16黑色素細胞瘤溫和的抑制作用，IC50為45.9μM和70.6 μM。在對木脂素的研究中，我們第一次通過線上HPLC-CD闡明了含有6,9-氧橋聯苯環辛烯木脂素的絕對構型。進一步，我們通過化合物在不同的氘代試劑（甲醇，氯仿，DMSO）中的穩定性，考察了含有6,9-氧橋聯苯環辛烯木脂素類化合物55和56的動力學數據。
