急性T淋巴細胞性白血病CCR9高表達的產生及調控機制研究

《急性T淋巴細胞性白血病CCR9高表達的產生及調控機制研究》是依託武漢大學，由張秋萍擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：急性T淋巴細胞性白血病CCR9高表達的產生及調控機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張秋萍
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

我們前期研究發現CCR9在T-ALL病人CD4+白血病T細胞上異常高表達與白血病轉移和耐藥密切相關，但有關CCR9高表達的產生及調控機制尚不明確，國內外未見相關研究。文獻報導T-ALL發病源於Notch1信號通路的異常激活，實體瘤中研究表明Notch1的異常高表達上調NFAT的表達水平，而NFAT的活化可以促進腫瘤的轉移並增強其耐藥性。我們新近實驗結果顯示：T-ALL患者白血病細胞中Notch1和NFATc2的表達水平明顯高於對照組；最新文獻報導NFATc2是正常T細胞中視黃酸依賴的CCR9高表達機制中必需的協同刺激分子。為明確T-ALL中CCR9高表達的產生及調控機制，本研究擬採用EMSA，ChIP，RNAi等技術，以NFAT為切入點，探討Notch1-HES1-NFAT信號通路在CCR9高表達的產生及調控機制中的作用，尋找阻斷白血病轉移和耐藥的新靶標，為T-ALL的治療提供新思路。

結題摘要

我們前期研究發現CCR9在T-ALL病人CD4+白血病T細胞上異常高表達與白血病轉移和耐藥密切相關，但有關CCR9高表達的產生及調控機制尚不明確，國內外未見相關研究。本課題主要研究了急性T淋巴細胞白血病CCR9高表達的產生及調控機制。Notch1的抑制劑DAPT可成功抑制T-ALL細胞系MOLT4 細胞Notch1的表達，同時Notch1的下游分子HES-1、NFATc1/c2/c3及CCR9的表達下降，並且有效抑制NFAT的入核。Notch1激活的NFAT 促進T-ALL細胞的遷移和耐藥。在MOLT4細胞中，Wnt家族中僅Wnt2b、Wnt5a和Wnt10b有明顯表達，其中Wnt5a經CCL25處理後表達水平顯著升高；抑制PKC後顯著降低了CCL25誘導的Wnt5a表達。GSEA基因富集分析的結果提示Wnt5a在成人T-ALL中與多種遷移侵襲生物學過程相關；體外遷移和侵襲實驗證實Wnt5a可以促進MOLT4細胞的遷移和侵襲，抑制或沉默PI3K/Akt或RhoA後顯著降低Wnt5a誘導的MOLT4細胞的遷移和侵襲。動物實驗表明Wnt5a可單獨或協同CCL25促進MOLT4細胞向肝臟轉移（浸潤）。Wnt5a可能通過協同CCL25誘導RhoA的活化參與CCL25介導的MOLT4細胞向其他器官的轉移（浸潤）。另外，本研究發現miR-146b-5p在T-ALL臨床樣本及細胞系中低表達，並可抑制T-ALL細胞遷移與侵襲作用，而IL-17A為miR-146b-5p的靶基因。T-ALL細胞可自分泌IL-17A，同時高表達IL-17RA。IL-17A通過NF-kB信號通路上調MMP9的表達，從而促進T-ALL細胞發生遷移與侵襲。IL-17A促進MOLT4細胞向肝臟遷移，同時中促進MDSC細胞在小鼠脾臟中浸潤。在T-ALL治療中，控制轉移和耐藥是目前治療的關鍵，本研究為闡明 CCL25/CCR9 介導的T-ALL 轉移（浸潤）提供理論依據，為T-ALL 的治療提供新的潛在治療靶標。