全自動胺基酸分析儀

儀器類別

儀器儀表 /成份分析儀器 /胺基酸分析儀

指標信息

指標信息：解析度：THR-Ser Ile-leu ≥98% 保留時間重現性：RSD≤0.5% (水解，所有峰) 峰面積重現性：RSD≤1% (水解，所有峰)

工作原理

測定原理是利用樣品各種胺基酸組分的結構不同、酸鹼性、極性及分子大小不同，在陽離子交換柱上將它們分離，採用不同pH值離子濃度的緩衝液將各胺基酸組分依次洗脫下來，再逐個以另一流路的茚三酮試劑混合，然後共同流至螺旋反應管中，於一定溫度下（通常為115～120℃）進行顯色反應，形成在570nm有最大吸收的藍紫色產物。其中的羥脯氨酸與茚三酮反應生成黃色產物，其最大吸收在440nm。

操作方法

樣品處理

測定樣品中各種游離胺基酸含量，可以除去脂肪雜質後，直接上柱進行分析。

測定蛋白質的胺基酸組成時樣品必須經酸水解，使蛋白質完全變成胺基酸後才上柱進行分析。

樣品分析

經過處理後的樣品上柱進行分析。上柱的樣品量根據所用自動分析儀的靈敏度來確定。一般為每種胺基酸0.1μmol 左右（水解樣品乾重為0.3mg 左右）。測定必須在pH5～5.5、100℃下進行，反應進行時間為10～15min，生成的紫色物質在570nm 波長下進行比色測定。而生成的黃色化合物在440nm 波長下進行比色測定。做一個胺基酸全分析一般只需1h 左右，同時可將幾十個樣品一起裝入儀器，自動按序分析，最後自動計算給出精確的數據。儀器精確度在±1～3%。用陽離子交換柱分離及測定胺基酸所的如下圖

結果計算

帶有數據處理機的儀器，各種胺基酸的定量結果能自動列印出來，否則，可用尺子測量峰高或用峰高乘以半峰寬確定峰面積進而計算出胺基酸的精確含量。另外，根據峰出現的時間可以確定胺基酸的種類。

說明

① 顯色反應用的茚三酮試劑，隨著時間推移發色率會降低，故在較長時間測樣過程中應隨時採用已知濃度的胺基酸標準溶液上柱測定以檢驗其變化情況。

② 近年出現的採用反相色譜原理製造的胺基酸分析儀，可使蛋白質水解出的17 種胺基酸在12min 內完成分離，且具有靈敏度高（最小檢出量可達1pmol）、重現性好以及一機多用等優點。

套用舉例

（一）醫學上的套用

■胺基酸代謝異常角度闡述了胺基酸與肝性腦病的關係

■血清中11種游離胺基酸的降低可直接影響人體組織的正常發育、生長

■必需胺基酸在創傷癒合中的關係

■ 腫瘤組織胺基酸代謝的變化規律

（二）飼料上的套用

■質量控制

各種飼料必需胺基酸的含量和它們之間的比例必須恰當，測定原料和產品中的胺基酸含量，以達到保證質量的目的。

■真偽鑑別

魚粉胺基酸組成特點是賴氨酸、蛋氨酸含量高，胺基酸分析結果很容易就可以辨別真偽。

全自動胺基酸分析儀

基本介紹