p53腫瘤抑制基因突變狀態的電化學識別及套用

《p53腫瘤抑制基因突變狀態的電化學識別及套用》是依託江蘇師範大學，由王頗擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：p53腫瘤抑制基因突變狀態的電化學識別及套用
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：王頗
• 依託單位：江蘇師範大學

項目摘要

p53腫瘤抑制基因的突變狀態與腫瘤細胞的形成和發展密切相關。本項目擬開展p53腫瘤抑制基因突變狀態的電化學識別與套用研究。針對不同序列的p53腫瘤抑制基因片段，建立電化學檢測方法，主要包括：構建合適的電化學界面，並將其套用於基因突變狀態的直接電催化氧化研究；以亞硫酸鹽轉化分析為基礎，建立基因突變狀態的免標記識別新方法；基於雙鏈DNA的電荷傳遞路徑，建立p53腫瘤抑制基因突變的電化學通道檢測法；根據表面等離子共振與電化學技術聯用的雙重信號，實時跟蹤基因突變的動態變化過程；製備操作簡便、快速靈敏的微陣列晶片，發展p53腫瘤抑制基因序列中多個突變熱點的同時檢測技術。並根據p53腫瘤抑制基因的突變狀態，考察腫瘤細胞的形成和發展過程，為疾病診斷和藥物篩選提供依據。本課題的開展必將豐富臨床檢驗新技術，對癌症的早期診斷和治療，以及遺傳學的機理研究具有十分重要的理論意義和實用價值。

結題摘要

基因突變是一種重要的生物學現象，p53腫瘤抑制基因的突變狀態與癌症的形成過程密切相關。本項目以電化學方法為研究工具，以功能化的電極界面構建為基礎，研究了p53腫瘤抑制基因突變狀態的電化學檢測新方法，並探究了其潛在的套用價值。主要研究內容包括：構建了多種適宜的電化學界面，例如石墨烯納米牆界面、功能化的單分子層界面、雙酶協同催化界面、碳納米網界面、貴金屬合金納米材料界面、聚合物導向下的碳納米管微電極界面等；建立了基因突變狀態的直接電催化氧化研究法；實現了p53腫瘤抑制基因序列中158密碼子四種突變狀態的電化學檢測；建立了以亞硫酸鹽轉化分析為基礎的基因突變檢測法；實現了p53腫瘤抑制基因序列中兩個甲基化突變位點的同時檢測；構建了GOD/HRP雙酶協同催化體系，並探究了其催化機理和感測套用；製備了紙基感測設備，實現了多個目標的電化學測定。本項目所構建的電化學界面具有電位視窗寬、電極活性高、背景電流小、抗污染能力強等優點，可套用於DNA鹼基序列的信號導出。基於界面構建，實現了各種DNA鹼基的信號識別和同時測定。與文獻的分析方法相比，本項目所建立的檢測方法具有較快的分析速度，較低的檢出限和較高的準確度。這些工作的開展對癌症的早期診斷和遺傳學的機理研究具有重要的意義。本項目所取得的研究成果先後發表於Chem. Commun.，Biosens. Bioelectron.，Electrochem. Commun.，J. Electroanal. Chem.，Sensor Actuat. B-Chem.，J. Electrochem. Soc.等學術期刊。這些論文已經被Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.，Trends in Analytical Chemistry，Chem. Commun.，Biosens. Bioelectron.，Electrochem. Commun.等雜誌多次引用，並得到了肯定的評價。