《miR-551參與胃癌發生髮展的作用及機制研究》是依託蘭州大學，由周永寧擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-551參與胃癌發生髮展的作用及機制研究
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：周永寧
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
研究表明 miRNA 與腫瘤的發生、轉移、耐藥等病理進程密切相關。我們前期發現miR-551在胃癌組織和細胞中，其表達均明顯下調，且與胃癌的臨床病理分期關係密切。本項目在前期研究基礎上，擬建立miR-551穩定過表達及沉默的胃癌細胞系，並構建裸鼠模型，通過生長曲線分析、集落形成、流式細胞分析及侵襲轉移相關實驗等，探討miR-551參與胃癌發生髮展的作用；通過生物信息學方法、蛋白晶片技術、雙螢光素酶報告基因分析、染色質免疫共沉澱及凝膠滯留實驗等技術，深入探討miR-551調控下游靶基因及上游轉錄調控的機制，闡明miR-551參與胃癌發生髮展的分子機制。通過我們的研究，將為胃癌發病機制以及未來的靶向治療提供新的思路和理論基礎。並有望提供新一代特異性高的理想分子標記物套用於胃癌的早期診斷及預後判效。
結題摘要
項目背景：MicroRNA晶片顯示miR-551b-3p在胃癌組織中表達下調，但是其在胃癌發生髮展中的作用及機制尚不明確。 主要研究內容：檢測miR-551b-3p在胃癌細胞和GES-1細胞，胃癌和癌旁組織中的表達。建立miR-551b-3p過表達胃癌細胞模型。通過細胞生長曲線測定、平板集落形成實驗、細胞凋亡測定、劃痕實驗、Transwell細胞遷移和侵襲實驗、裸鼠移植瘤實驗等分析上調miR-551b-3p表達後對胃癌細胞增殖、遷移、侵襲等生物學行為的影響。篩選miR-551b-3p的靶基因及上游lncRNA。通過雙螢光素酶報告基因實驗驗證miR-551b-3p和靶基因、上游lncRNA和miR-551b-3p的相互作用。採用Western blot技術檢測胃癌細胞過表達miR-551b-3p後靶基因的表達變化。通過細胞生長曲線測定、Transwell細胞遷移實驗檢測上游lncRNA對胃癌細胞增殖、遷移的影響，以及改變上游lncRNA表達水平對miR-551b-3p及其靶基因表達的影響。 重要結果：miR-551b-3p在胃癌細胞株中的表達低於其在GES-1中的表達，在胃癌組織中的表達水平低於癌旁組織，且與胃癌患者腫瘤分化程度呈正相關，與局部浸潤深度及淋巴結轉移呈負相關，miR-551b-3p高表達胃癌患者的生存期高於miR-551b-3p低表達的患者。胃癌細胞過表達miR-551b-3p可以明顯抑制細胞的增殖、抑制細胞的克隆形成、促進細胞的凋亡、抑制細胞遷移和侵襲能力、體內生長能力。TMPRSS4是miR-551b-3p的直接靶基因，lncRNA SMARCC2可以通過自身的miR-551b-3p結合位點與miR-551b-3p相互作用，並調控miR-551b-3p在胃癌細胞中的表達水平。LncRNA SMARCC2 促進胃癌細胞體外增殖、遷移能力。LncRNA SMARCC2通過ceRNA機制調控胃癌細胞TMPRSS4的表達。 科學意義：本項目首次發現LncRNA SMARCC2/miR-551b-3p/TMPRSS4軸在胃癌發生髮展中扮演重要角色。為尋找胃癌早期診斷、評估患者分級、分期及預後的標記物提供了一個可能的選擇，並有助於了解 miR-551b-3p 在胃癌分子調控網路中所處的位置及扮演的角色，為進一步探索 miR-551b-3p 套用於胃癌臨床治療提供
