《miR-363調控肺腺癌幹細胞促進腫瘤轉移的分子機制研究》是依託復旦大學，由盧韶華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-363調控肺腺癌幹細胞促進腫瘤轉移的分子機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：盧韶華
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤轉移是影響肺癌預後的關鍵因素。在肺癌侵襲轉移鏈中，EMT (epithelial mesenchymal transition)是肺癌轉移的重要驅動力，而CSC(cancer stem cell)是肺癌轉移的決定性因素。前期工作我們通過雷射捕獲顯微切割從轉移組及非轉移組肺腺癌組織中分離純淨腫瘤細胞，進行Aglient miRNA晶片分析,篩選出表達顯著升高且居首的miR-363，且證實miR-363在肺腺癌EMT、侵襲及轉移中起著關鍵作用。本項目擬以肺腺癌幹細胞及臨床肺腺癌標本為研究對象，進一步觀察miR-363對Numb、E-cadherin和β-catenin分子表達、亞細胞定位、代謝及轉錄功能變化，探討miR-363對Wnt/β-catenin及Notch信號通路傳導的影響及其在肺腺癌幹細胞促進腫瘤轉移中的作用，為基於miR-363的肺腺癌轉移分子預測及靶向治療奠定理論基礎。
結題摘要
本項目經過4年努力,已完成大部分實驗研究。篩選出miR-375的37個候選靶基因可能參與調節SCLC的已知相關信號通路; 運用qRT-PCR法,我們對37個基因在50例顯微切割的SCLC標本中進行了組織水平的驗證。結果顯示,包括Runx1、ITPKB在內的6個基因為SCLC中miR-375的目的靶基因。通過與轉染實驗相結合的螢光定量RT-PCR、Western-blot和螢光素酶活性檢測實驗進行功能研究，預測並驗證了miR-375的靶基因ITPKB。通過細胞增殖實驗證實miR-375可通過靶基因ITPKB促進細胞增殖。結合已報導的ITPKB在細胞調控中的多種作用,提示miR-375在SCLC發病分子機制中具有重要作用,並有望成為SCLC診斷與治療的潛在靶點。 通過雷射捕獲顯微切割從轉移組及非轉移組肺腺癌組織中分離純淨腫瘤細胞，進行Aglient miRNA晶片分析,篩選出表達顯著升高且居首的miR-363，且證實miR-363在肺腺癌EMT、侵襲及轉移中起著關鍵作用。肺腺癌幹細胞及臨床肺腺癌標本中進行體內外實驗，研究了miR-363對E-cadherin和β-catenin分子表達及轉錄功能變化，正在進一步對miR-363在肺腺癌轉移中信號通路的作用機制進行研究。 在肺癌組織miRNA篩選及鑑定的基礎上，運用106例肺癌血漿晶片篩選出顯著差異表達的miRNA，並於565例training cohort進行驗證， 選出13個顯著差異表達的miRNA，進一步於416例肺癌血漿進行驗證，由此建立兩個miRNA數學模型進行鑑別診斷。A：由6個microRNAs (miR-17, miR-190b, miR-19a, miR-19b, miR-26b, and miR-375)組成的panelA能準確鑑別肺癌及高危人群(AUC 0.873 and 0.868). SCLC與NSCLC（miR-29a與miR-375）和SQ與AC（miR-34a與miR-205）。B：由3個microRNAs (miR-17, miR-190b, and miR-375) 組成的panelB能準確鑑別SCLC及NSCLC. 項目期間，作為第一作者發表基金標註SCI論文3篇。並多次於國內、國際會議做關於miRNA與肺癌研究機制發言。課題培養研究生2名。
