miR-34a通過Foxp3調控Treg功能及其在SLE疾病中的作用

《miR-34a通過Foxp3調控Treg功能及其在SLE疾病中的作用》是依託江蘇大學，由劉霞擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR-34a通過Foxp3調控Treg功能及其在SLE疾病中的作用
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：劉霞
• 依託單位：江蘇大學

項目摘要

Treg在維持機體免疫自穩中具有重要作用，有可能被套用於自身免疫病治療。然而近年來研究表明Treg在自身免疫病患者中表現出分泌IL-17等Th17特徵，過繼治療的Treg在炎症部位變成Th17細胞，說明Treg可以向Th17轉化。Foxp3是nTreg的關鍵調控因子，目前已發現Foxp3表達調控受表觀遺傳調控，長期研究發現T細胞發育分化和功能受miRNA的調控。我們採用生物信息學預測及預實驗驗證，發現miR-34a、31負向調控Foxp3作用最為顯著。因此我們構想：miR-34a可直接負向調控Foxp3表達，從而調控Treg發育分化及功能，有可能促進SLE等自身免疫性病的發生、發展。本項目通過研究miR-34a對小鼠Treg中Foxp3表達調控機制，闡明miR-34a在Treg與Th17之間轉化和SLE等自身免疫病發病過程中的作用機制，為治療自身免疫病尋找新靶標奠定基礎。

結題摘要

調節性T細胞（regulatory T cells，Treg）在預防自身免疫病及維持免疫穩態中發揮重要作用。Foxp3是Treg細胞的關鍵性轉錄調控因子。近年來發現miRNA對T、B細胞的發育起關鍵的作用，但目前有關miRNA對Foxp3表達調控的相關報導較少。我們採用生物信息學預測調控人、鼠Foxp3的miRNAs，發現人和鼠的miR-34a和鼠的miR-31對Foxp3具有調控作用，因此我們假設miR-34a和miR-31可以通過負向調控Foxp3的表達，從而抑制Treg細胞的分化和功能，促進Treg細胞向Th17轉化，引起或加劇自身免疫性疾病的發生、發展。本課題從①生物信息學預測負向調控Foxp3的miRNAs；②不同T細胞miR-34a、miR-31表達水平與Foxp3表達的相關關係；③miRNAs表達載體、抑制性載體的構建及驗證對Foxp3的調控作用；④miR-34a、miR-31對Foxp3的表達調控機制; ⑤建立miR-34a基因敲除的DBA1和DBA2。⑥在miR-34a基因敲除的C57B6小鼠和DBA2以及正常小鼠中建立CIA模型，採用miR-34a及其inhibitor對上述小鼠進行治療；⑦部分臨床SLE患者的標本驗證等七個方面進行了研究。研究初步結果表明①預測到作用於小鼠和人Foxp3基因的miRNAs中miR-34a與miR-31的效果最為明顯；②而在體外誘導的Th17細胞中miR-34a和miR-31的表達升高。miR-34a和miR-31在iTreg細胞和TGF-β誘導的EL4細胞中的表達水平下調；③成功構建miR-34a和miR-31的逆轉錄載體和慢病毒載體及初步驗證對Foxp3的調控作用；④IL-6和/或TNF-α信號通路通過NF-κB介導了miR-34a及miR-31對Foxp3的表達調控；⑤成功建立miR-34a基因敲除的DBA1和DBA2小鼠；⑥在miR-34a轉基因C57BL/6小鼠和正常小鼠中建立CIA模型，miR-34a轉基因C57BL/6小鼠關節炎更為嚴重。⑦SLE患者PBMCs中Treg細胞群體變化與miR-34a的表達變化呈負相關。本研究初步結果表明miR-34a和miR-31可以負向調控Foxp3的表達，進而影響Treg/Th17細胞的平衡，為自身免疫性疾病的診斷、治療以及疾病預後的判斷提供了一個新的靶點。