CpG-A20納米DNA載體治療潰瘍性結腸炎的作用及機制研究

《CpG-A20納米DNA載體治療潰瘍性結腸炎的作用及機制研究》是依託深圳大學，由劉志強擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：CpG-A20納米DNA載體治療潰瘍性結腸炎的作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：劉志強
• 依託單位：深圳大學

項目摘要

作為常見的炎性腸病，潰瘍性結腸炎（UC）發病機制的關鍵因素是免疫系統針對腸道菌群及食物抗原的異常炎症反應，目前國內外仍缺少針對UC靶向性治療方法的研究。腸道樹突狀細胞（DC）處在啟動、調控免疫反應的關鍵地位，通過表達A20可負性調控腸道免疫炎症、誘導耐受型DC（Tol-DC）的產生，有望成為UC治療靶點。我們首次構建了插入CpG寡核苷酸序列，表達負性免疫調節分子A20的DNA載體（P-pCA），本課題擬在前期工作基礎上進一步研究：P-pCA納米DNA載體製備最佳工藝條件、細胞攝取情況、體內吸收及代謝；明確P-pCA納米DNA載體對小鼠潰瘍性結腸炎的治療效果及對腸道局部炎症、Th細胞失衡及腸道黏膜屏障的調節作用；闡明P-pCA納米DNA載體調控p53蛋白影響潰瘍性結腸炎腸道黏膜上皮細胞及炎症細胞增殖及凋亡的分子機制。有望為炎性腸病靶向性生物治療手段研發提供理論依據並開發出新型免疫藥物。

結題摘要

近年來，隨著人民生活水平的提高和環境的污染，IBD 發病率和患病率在我國呈明顯增長趨勢，嚴重影響患者生活和工作，給社會、經濟帶來巨大負擔。目前國內外仍缺少針對潰瘍性結腸炎靶向性DNA 載體治療方法的研究。本研究探討了一種表達去泛素化酶A20 的納米DNA 載體靶向性治療潰瘍性結腸炎的作用及其機制，首先，我們構建了A20真核表達載體，並經聚乳酸-乙醇酸（PLGA）包封製備了A20納米DNA疫苗，確定了其形態、大小、粒度分布等指標，評價了其轉染進入細胞的效率。其次，構建了小鼠潰瘍性結腸炎模型，並經結腸黏膜給予A20納米DNA疫苗進行治療，進一步評價了其對小鼠結腸炎症的抑制效果。最後，按照年度研究計畫，評價了A20納米DNA疫苗對結腸炎小鼠腸道黏膜屏障功能及相關炎症因子表達水平的影響，完成既定研究計畫。研究結果顯示，成功製備出了以PLGA 包封的pVAX1- A20 納米DNA 載體，並可有效體外轉染腸道上皮細胞； PLGA-pVAX1A20 納米DNA 載體可以抑制潰瘍性結腸炎小鼠結腸炎症，抑制NF-kB下游信號的激活，並誘導Treg細胞產生，降低炎性結腸黏膜通透性，抑制Th2細胞反應；腸道黏膜DC細胞可表達Foxp3，並可經葡萄球菌腸毒素刺激後上調Foxp3的表達；miRNA-17-92可抑制腸道黏膜B細胞中IL-10的表達。目前已發表課題相關SCI論文10篇以上，提交申請發明專利5項，培養碩士研究生3名，完成課題研究目標。本課題後續研究仍在進行中，通過本課題的實施，有望為炎症性腸病提供新的治療方法。