CRP(C反應蛋白)

CRP是一種環狀五聚體蛋白，其一級結構包含5個相同的亞單位（23KD)，亞單位間以非共價鍵相結合，每個弧單位在其表面都含有CRP配體結合位點(與配體的結合需Ca2+參與)，其另一面含有Clq及FcTR結合位點[1]。這種五聚體蛋白具有顯著的耐熱及抗蛋白酶降解的能力。白細胞介素一6(interleukin-6，IL一6)是CRP合成的主要刺激因子。在mRNA水平還受到白細胞介素一1(interleukin一1，IL一1)、皮質激素等影響。與五聚體蛋白家族的另一成員血清蛋白P(serum protein P，SAP)不同，SAP經過糖基化修飾，而CRP經過未知的翻譯後修飾。

基本介紹

• 中文名：C反應蛋白
• 外文名：C reactive protein

簡介

CRP=C reactive protein，C反應蛋白

CRP，肺炎球菌細胞壁c多糖蛋白，一種急性時相（期）蛋白，亦稱C反應蛋白，正常參考值≤10mg/L。本身由肝細胞產生能結合肺炎球菌細胞壁糖蛋白，能監測疾病的發展情況為非特異性的檢驗指標，很多疾病時都可以表現出來。

C反應蛋白

CRP是一種環狀五聚體蛋白，其一級結構包含5個相同的亞單位（23KD)，亞單位間以非共價鍵相結合，每個弧單位在其表面都含有CRP配體結合位點(與配體的結合需Ca2+參與)，其另一面含有Clq及FcTR結合位點[1]。這種五聚體蛋白具有顯著的耐熱及抗蛋白酶降解的能力。白細胞介素一6(interleukin-6，IL一6)是CRP合成的主要刺激因子。在mRNA水平還受到白細胞介素一1(interleukin一1，IL一1)、皮質激素等影響。與五聚體蛋白家族的另一成員血清蛋白P(serum protein P，SAP)不同，SAP經過糖基化修飾，而CRP經過未知的翻譯後修飾。

主要功能

CRP與補體Clq及FcTR的相互作用使其表現出很多生物活性，包括宿主對感染的防禦反應、對炎症反應的吞噬作用和調節作用等。與受損細胞、凋亡細胞及核抗原的結合，使其在自身免疫病方面也起著重要作用。

首先，CRP的檢測被廣泛用於監測不同的炎症狀態，也可用於監測對炎症的治療效果。隨著高靈敏度的檢測方法的不斷發展，CRP還是心血管疾病強的預測因素，並且是動脈粥樣硬化的重要介質。更為重要的是研究發現，在小鼠的狼瘡性腎炎中發現，CRP能延遲狼瘡性腎炎的發病、降低抗體水平、提高了小鼠的存活率並使尿蛋白症狀減輕。依賴鈣離子，CRP還能與受損組織以及某些病原微生物結合，表現出其在天然免疫系統中的重要作用。CRP與FcTR的相互作用誘導前炎性細胞因子(IL一6等)的產生，從而放大了炎症反應。CRP在IL一6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)及其他細胞因子的誘導下能在肝臟快速合成，通常炎症刺激後24～48 h血清CRP水平出現峰值，血清CRP水平會從每毫升小於1 p-g增加到每毫升幾百微克，而且隨著疾病的消除，CRP能從血循環中快速清除。由於CRP不受年齡、性別、貧血、妊娠等機體狀態和治療藥物等因素的影響，因此CRP是感染性炎症反應的敏感指標。

CRP與獲得性免疫系統的重要介質——免疫球蛋白具有很多相同的特徵。與免疫球蛋白IgG相似，CRP能與Clq結合，活化補體經典途徑，對不同的病原體具有調理素作用。與IgG不同的是，CRP不具有特異識別不同抗原表位的能力，但能識別自身的改變和外源性分子，這種識別作用會導致前炎性反應信號的產生，激活獲得性免疫系統，從而提高了機體防禦能力。

最近的研究發現，CRP通過與細胞表面Fc7受體的結合而與免疫細胞產生相互作用，因此可能在天然免疫系統和獲得性免疫系統間架起了橋樑，從而提供了早期、有效的抗菌反應，這是CRP對機體防禦反應的主要機制之一。此外，CRP能抑制機體對脂多糖的損傷性炎症應答，因此阻止了細菌代謝產物對機體的致命性作用。人類FcTR至少有3種類型，高親和力受體CD64和兩個低親和力受體CD32和CDl6，人CRP的FcTR主要存在於單核細胞和巨噬細胞。

各種因素對CRP的影響

1.病人的年齡：兒童較正常成年人CRP結果低，重新合成有關

2.吸菸：吸菸可影響病人的CRP水平基線

3.營養狀況：嚴重的營養不良可以消弱CRP的產生

4.激素狀況：嚴重的激素不足可以消弱CRP的產生

5.懷孕：懷孕期間CRP水平有少量的增加，在分娩時達到20mg/L

6.臨床狀況：並發感染的過程將影響CRP的水平

7.疾病的持續時間：CRP水平在發病的第一個12小時內可能是正常的

8.感染類型：病毒和表淺細菌感染只引起較低水平的CRP水平增高，全身性的和深度的細菌感染引起大幅度的CRP水平的增高

9.治療藥物的影響：抗生素及皮質類固醇的治療將影響CRP水平

10.單個和連續的測量：連續的CRP測量和單個樣品的測量相比，通常有更好的診斷價值和療效評價的意義

健康狀況下的CRP正常範圍

臨床上一般<8mg/L為正常，

所有年齡段 <6mg/L （平均低於1mg/L）

新生兒： <3.2mg/L （平均0.32mg/L）

兒童： <2.2mg/L （平均0.16mg/L）

成年男性： <5.2mg/L （0.55mg/L）

成年女性： <4.6mg/L （平均0.42mg/L）

吸菸者： 中值為11.5mg/L

孕婦： <20mg/L

CRP的臨床意義

1.鑑別診斷細菌、病毒感染。

CRP與血常規一起檢測更有實用價值。

病毒感染時CRP測定值沒有明顯增高。

CRP 6—12h後濃度開始升高。

CRP 24—48h後達到最大值。

反覆的炎症刺激,CRP水平可持續上升。

發熱患者連續的CRP檢測對診斷更有價值。

<12h	<20mg/L	不能確診細菌感染
8--12h再測	升高	確診細菌感染
	浮動不大	確診病毒感染

2.監測疾病的活動情況和嚴重度。

a.內科感染性疾病

細菌性肺炎	平均增高 200mg/L
活動性結核	升高與ESR比較不受性別、貧血、高球蛋白、妊辰影響。
膀胱炎	<30---50mg/L
腎盂腎炎	高值230mg/L，中值75mg/L，底值>10—20mg/L
肝臟異常	CRP合成降低
敗血症	均值150---200mg/L
心內膜炎
腦膜炎
骨髓炎

b. 全身感染性疾病

類風濕性關節炎	>200mg/L	活動期
系統性紅斑狼瘡	>60mg/L	並發細菌感染
惡性腫瘤	高達300mg/L	出現轉移或細菌感染
	>10mg /L	（治療中）預後不好
白血病	>100mg/L	考慮感染
再障病人	CRP+血培養	區分細菌、病毒感染

c.外科疾病和感染

時間	CRP值	診斷
少於12h	可能正常	含糊
幾小時	升高	有價值
備註	與WBC綜合分析是最佳指標。二項均正常
	可排除，某一項升高全面考慮是否手術。

d.組織損傷和術後感染

微創手術與開放手術比較，前者CRP均值20mg/L，後者CRP均值100mg/L。（膽囊切除）

術後6—8小時CRP開始增加，2—4天達最高峰。 6天后>75mg/L提示有並發感染。

肝移植排異反應不會引起CRP上升，術後細菌感染CRP可大幅度上升。

肝功能減退的病人，蛋白合成障礙CRP會低於正常。評估CRP時應考慮肝功能影響。

e.婦科及孕婦的感染

懷孕期	6mg/L
分娩期	20mg/L
順產後	60mg/L
順產24h後	25mg/L
婦產48h	150mg/L
表示感染	超出或更高

f.心血管疾病的臨床意義

廣泛心肌梗塞	160mg/L
輕度心肌梗塞	40mg/L
不穩定心絞痛	略高
穩定心絞痛	正常
冠狀動脈性心臟病; （CHD）	高敏C-反應蛋白新指標; （HSCRP）
動脈栓塞/靜脈栓塞	前者高/後者底（與缺血時間相關）

3.觀察治療效果。

時 間	CRP 值	療 效
3---4天	下降	療效滿意
2---4周	正常
備 注	否則應考慮更換抗菌素

4.對抗生素的合理套用有提示性作用。

二例肺炎患者治療後CRP、WBC變化

試驗 WBC×109 CRPmg/L

天數 1 2 3 4 1 2 3 4

病例

病例1 13.8 7.2 6.3 4.4 168 141 70 18

病例2 8.6 7.0 4.8 4.6 220 74 35 22

上表說明：

* CRP在抗生素治療前後變化幅度值明顯> WBC值說明CRP敏感性較高。

* 單一觀察WBC值可能會掩蓋對疾病發生髮展及治療效果觀察。WBC正常幅度較大：4 .0－10.0×109/L。有些低WBC人，8.0已是高值；即使出現WBC升高，亦在24h後。

*CRP動態觀察可以較好地指導臨床用藥。

在心血管疾病及自身免疫性疾病中的作用

CRP與心血管疾病

研究發現，動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)不僅僅是脂質在血管壁的沉積，而是一種慢性炎症反應過程，前瞻性研究已明確CRP是CVD存在和將來發生的獨立預測因素。套用乳膠增強凝集免疫比濁法測定CRP，可以檢測到較低水平的CRP，即超敏CRP(high sensitivity CRP，hs—CRP)。CRP水平與腰圍及體重指數(BMI)呈正相關，另外吸菸者CRP水平明顯高於不吸菸者。CRP已成為CVD的重要預測性指標，CRP預測CVD的發生獨立於其他傳統預測指標，這些萬方數據傳統指標包括高血壓、糖尿病、高血脂、吸菸、肥胖等，而且，hs—CRP和總膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比率聯合使用比單一因素能更強地預測CVD的發生。

多變數分析表明，CRP是急性代償失調的心力衰竭患者心血管死亡率的獨立預測因素，這也表明了炎症是這種疾病的病理生理過程的重要成分。hs—CRP不僅能預測具有亞臨床CVD症狀的老年女性將來CVD的發生趨勢，而且也能預測中年男性在今後6～7年CVD發生的高度危險性，甚至對表面看似健康的個體也能預測將來CVD發生的危險性。hs—CRP濃度預測AS的進展獨立於傳統危險因素，降低CRP水平和抑制炎症反應的治療策略可以阻止AS的進展，從而阻止CVD的發生。CRP水平大於15 mg/L是不穩定型心絞痛患者90 d內病情惡化的強有力預測因子。Morrow等發現CRP水平低於10 mg/L及肌鈣蛋白陰性的患者二4年隨訪死亡率接近於0，而肌鈣蛋白陰性合併高水平CRP患者的死亡率顯著升高。CRP水平大於15．5 mg/I，時，不穩定型心絞痛以及非ST段抬高的心肌梗死患者死亡率增加了18倍。在歐洲CVD高危險人群中，hs—CRP水平男性高於女性，而正常情況下，女性hs—CRP水平高於男性。hs—CRP預測CVD的能力對於女性取決於其BMI，而男性則取決於腰圍；最高的hs—CRP水平主要見於BMI和腰圍都高的患者。CRP水平的差別並不能解釋歐洲人CVD發生的危險性。

儘管CRP作為CVD發生的預測指標得到很多學者的支持，但升高的CRP參與動脈斑塊的形成而直接導致CVD，或僅僅是炎症的非常敏感的指標還存在很大的爭議。套用載脂蛋白一E缺乏轉基因小鼠研究人CRP提供了CRP參與動脈損傷的直接證據，在CVD中，CRP通過促進巨噬細胞對低密度脂蛋白的吸收而加速了AS的進展，促使動脈內壁脂質沉積，導致血栓形成。另外，CRP與血管內皮細胞上FcTR結合，促進細胞黏附分子、單核細胞趨化蛋白一1、內皮素一1、IL一8、纖溶酶原激活物抑制劑的表達。在AS炎症部位浸潤的細胞主要為巨噬細胞和T淋巴細胞，單核細胞趨化蛋白一1表達的增加，促進單核細胞的增殖、活化、向血管內皮細胞的遷移和黏附等功能，活化的巨噬細胞與血管內皮細胞和平滑肌細胞的相互作用，誘導基質降解酶的產生，這種酶通過分解纖維帽使粥樣斑塊破裂，活化的巨噬細胞還可以分泌血管活性物質和凝集分子使血管收縮、血栓形成。另外CRP也同單核細胞趨化蛋白一1一樣對單核細胞具有正向趨化作用，並能誘導炎症細胞因子的產生、促進組織因子的表達。

CRP與自身免疫性疾病

研究發現，CRP能與核抗原結合，這些核抗原包括核染色質、核蛋白小體等。CRP能促進巨噬細胞對核抗原的吞噬作用，影響了抗原的提呈，掩蔽了自身抗原被免疫系統識別。另外，CRP還能通過與FcTR的結合，促進自身抗原的清除，從而可能阻止自身免疫應答，抑制某些自身免疫病的發生。

系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種全身性自身免疫性疾病，表現為多器官、多臟器受累。SLE患者體記憶體在多種針對細胞質及細胞表面抗原的多種自身抗體。siowall等報導，SLE患者即使是處於疾病活動期，其血清CRP水平一般很低，而其他急性時相蛋白水平卻很高，如最主要的促進CRP產生的誘導因子IL-6。CRP在自身免疫疾病中的重要作用是作為調理素，促進凋亡細胞的清除，如核小體，從而阻止了機體對自身抗原的免疫應答。

許多學者認為SLE是瀕死細胞釋放的內源性核抗原引起的自身免疫應答，這種假說基於對核染色質應答的自身抗體的特徵，基於對暴露於凋亡細胞上的自身抗原異常表位的識別以及對凋亡細胞的清除。CRP除了能清除核染色質外，還能與凋亡細胞結合，CRP通過補體依賴的調理作用促進巨噬細胞對凋亡細胞的吞噬，從而具有抗炎作用。

MRL/lpr小鼠是人類SLE重要的動物模型，這些小鼠表現為高滴度抗雙鏈DNA抗體、免疫複合物介導的腎小球腎炎、淋巴結病等。Marnell等發現MRL/Ipr小鼠產生蛋白尿之前注射CRP會延緩疾病的進展，產生蛋白尿後注射CRP治療也會使蛋白尿消失。由此可見，在這些動物模型中CRP起著抗炎作用。另外值得一提的是，SLE患者血URP水平與IL一6無相關性，而在健康人群血清CRP水平與血清IL-6呈高度正相關。

白細胞介素一10(interleukin一10，IL一10)是具有抗炎活性的細胞因子，CRP能促進IL一10的合成。增加的IL一10有助於控制免疫系統對自身抗原的應答，從而抑制了對宿主的損傷。在IL-10缺乏細胞毒性腎小球腎炎小鼠模型中，CRP並不能阻止或降低尿蛋白，這表明CRP的抗炎活性可能由IL一10介導。

生物工程中套用

CRP 細菌中的受體蛋白（cAMP Receptor Protein，CRP；也稱為降解物基因活化蛋白，Catabolite gene activator protein, CAP）特異結合，使CRP構象改變而活化。CRP上有重要的三個位點參與基因轉錄激活過程：與RNA pol的a亞基的羧基端結合區域（aCTD）、與a亞基的氨基端結合區域（aNTD）以及與s亞基結合區域。CRP以二聚體形式與DNA結合而發揮作用，二聚體可被單個cAMP激活，CRP單體包括一個DNA結合區和一個轉錄激活區。

CRP二聚體約結合22bp的序列

5'-AAATGTGATCTAGATCACATTT-3'

3'-TTTACACTAGATCTAGTGTAAA-5'

CRP的結合可使DNA彎曲成90°，結合位點的彎曲可通過電泳遷移率檢測

在不同的操縱子中，CRP的作用可能有三種不同的方式。

在Lac操縱子中，CRP結合在緊鄰啟動子上的RNA pol結合位點上游，與aCTD發生作用，同時與b和s亞基相互作用。

在gal操縱子中，CRP結合區域與RNA pol結合的區域有重疊，它與aCTD、aNTD以及s亞基都有相互作用。

CRP在一些操縱子中可能有2個或多個二聚體結合在DNA的不同位點，例如在ara操縱子中，結合在2個不同位點上的CRP發揮作用。

被cAMP活化的CRP能與1ac操縱子的啟動子上游CRP位點特異結合。有利於形成轉錄起始複合物，並增強了RNA聚合酶的活性。使lac operon得到表達。

有葡萄糖時，cAMP濃度降低，CRP不能被活化，1ac操縱子表達下降。由於P1ac是弱啟動子，只因乳糖的存在而發生去阻遏而使1ac操縱子開放表達水平很低；有CRP加強轉錄活性，細菌才能合成足夠的酶來利用乳糖

可控自由基聚合

可控/活性自由基聚合（controlled radical polymerization）是在聚合體系中引入一種特殊的化合物，它與活性種鏈自由基進行可逆的鏈終止或鏈轉移反應，使其失活變成無增長活性的休眠種，而此休眠種在實驗條件下又可分裂成鏈自由基活性，這樣便建立了活性種與失眠種的快速動態平衡。這種快速動態的平衡反應不但使體系中的自由基濃度控制得很低而且抑制雙基終止，而且還可以控制聚合產物的分子量和分子量分布，實現活性/可控自由基聚合。