YCp

YCp

YCP是從海洋真菌Ys4108的菌絲中提取純化獲得的1種大分子水溶性胞內多糖。研究表明 YCP具有顯著的體內抗腫瘤活性,可顯著抑制小鼠 S180和Heps等移植性腫瘤以及Lewis肺癌的生長,同 時對動物細胞的免疫體液免疫功能均有明顯的調節作用,其硫酸酯化產物能引入新的抗氧化活性。

基本介紹

  • 中文名:海洋真菌多糖
  • 外文名:marine fugal polysaccharide
  • 縮寫:YCP
  • 來源:真菌菌絲
  • 溶解性:水溶性
  • 屬性:胞內多糖
  • 生理活性:抗腫瘤、抗氧化、免疫活性等
簡介,分離純化,檢測方法,功能,免疫活性,抗氧化活性,

簡介

海洋真菌多糖(YCP)是從海洋真菌菌絲體提取、分離純化得到的一種多糖。初步藥理實驗表明其具有抗腫瘤活性,有較廣的套用前景。隨著進一步開發研究,多糖YCP有望創製成擁有我國自主智慧財產權的抗腫瘤1類新藥。

分離純化

超濾法
鈕明洋等用超濾法代替透析法去除海洋真菌多糖提取液中的單糖等小分子雜質。方法採用中空纖維超濾膜,對多糖蛋白質後的提取液通過超濾去除小分子雜質,同一批提取液中取出部分用透析法處理,作平行對照。結果原液濃度、操作壓力等影響參數最佳化後得到的產品,多糖得率和含量都不低於對照組,而且洗脫曲線也與對照組相似。結論:超濾法適用於海洋真菌多糖的分離純化,可供中試生產使用。

檢測方法

韓躍等建立酶聯免疫吸附法(ELISA)以檢測海洋真菌多糖Ys4108發酵過程中抗腫瘤多糖(YCP)的含量。方法以cDAP(1-氰基-4-二甲胺吡啶四氟硼酸鹽)為交聯劑製備YCP-BSA偶聯產物,利用該偶聯產物為包被抗原,YCP為競爭抗原,兩者與定量的YCP-McAb反應,建立檢測YCP的間接競爭ELISA測定法。結果:最佳抗原包被濃度為2.5 mg/L,最佳單抗工作濃度為1:5 000,HRP-抗小鼠IgG工作濃度為1:4 000。:可測量最適範圍為1—1 000μL,最小檢測量為0.1μg/L,批內和批間RSD分別小於5.45%和8.37%。結論建立了快速測定YCP含量的間接競爭ELISA法。

功能

免疫活性

嚴薇等採用人唾液α-澱粉酶降解多糖YCP,得到了相對分子質量約為6.6×103的酶解片段。分析其理化性質發現多糖YCP經過酶降解後單糖組成以及端基碳構型等均未發生變化。但小鼠腹腔巨噬細胞NO誘生實驗,中性紅吞噬實驗均顯示降解後多糖YCP原有的誘導巨噬細胞生成NO和促進巨噬細胞吞噬中性紅的能力顯著下降。以上實驗結果提示YCP的完整分子可能對維持YCP的免疫活性具有重要作用。
有研究認為多糖可能像蛋白一樣,存在著一定的活性中心,多糖通過該活性中心與受體結合。與受體結合還需要合適的構象,而多糖的其他部分為其提供構象支持,從而使其與多糖受體結合併活化啟動細胞內的信號傳導途徑而產生效應功能。如肝素抗凝血活性只需5個寡糖片段,這5個寡糖片段可能就是肝素保持抗凝血活性所必需的活性中心部位。文中巨噬細胞表面相關受體競爭性結合實驗的結果說明,降解後的YCP多糖片段與巨噬細胞表面相關受體結合的能力顯著下降。因此推測其免疫活性顯著下降的原因可能是經過人唾液α-澱粉酶降解後,破壞了多糖YCP中與巨噬細胞表面相關受體結合的活性中心的一級結構或空間構象,從而不能激活細胞內相關的信號傳導通路,影響了YCP的相關生物活性。

抗氧化活性

鹼提海洋真菌(YC4108)多糖YCP進行硫酸酯化產物製備並研究其體外抗氧化作用。利用鹼提法從海洋真菌(YC4108)的發酵菌絲體中獲得一種結構全新多糖,通過氯磺酸一吡啶法對多糖進行硫酸酯化修飾,並體外觀察硫酸酯化多糖對超氧化物自由基清除作用、羥基自由基清除作用、丙二醛(MDA)清除作用以及總抗氧化活性。結果表明:通過鹼提得到一種重均相對分子質量為66 k的海洋真菌多糖 ,硫酸酯化後得到3種不同取代度的硫酸酯化產物YCC-SL,YCC-SM和YCC-SH。YCC-SM和YCC-SH對超氧陰離子、羥自由基和MDA具有明顯的清除作用,在總抗氧化能力實驗中也表現出較強的活性。所以說,隨著硫酸基團含量的增加,抗氧化活性大大提高。

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