TrkA脂筏色譜及其在中藥抗腫瘤活性成分篩選中的套用

《TrkA脂筏色譜及其在中藥抗腫瘤活性成分篩選中的套用》是依託江蘇大學，由余江南擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：TrkA脂筏色譜及其在中藥抗腫瘤活性成分篩選中的套用
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：餘江南
• 依託單位：江蘇大學

項目摘要

本項研究重在研製富含酪氨酸蛋白激酶A（TrkA）受體的脂筏色譜固定相，構建生物親和色譜新模型，探討TrkA脂筏色譜在中藥抗腫瘤活性成分高效篩選中的套用可能。主要研究內容包括：研製富含TrkA受體的脂筏色譜固定相，並對其表面特徵、生物活性、穩定性與耐用性進行評價；研究、比較TrkA脂筏色譜與細胞膜色譜以及其他色譜類型在保留行為、生物親和特性等方面的差異，探討脂筏色譜的分離機理；選擇牛膝等具有抗腫瘤活性的中藥，運用TrkA脂筏色譜確定中藥的活性部位，篩選抗腫瘤活性成分；選擇TrkA高表達的神經膠質瘤細胞株U251，通過考察細胞增殖及細胞凋亡情況，評價中藥TrkA抑制劑的抗腫瘤活性，研究中藥TrkA抑制劑的色譜保留行為與其抗腫瘤活性之間的相關性。本項研究目的在於為中藥抗腫瘤藥物的高效篩選提供新的共性平台。

結題摘要

本項研究重點圍繞TrkA脂筏色譜新模型的建立及其在中藥抗腫瘤活性成分篩選中的套用開展研究，主要內容包括：1.成功製備了富含TrkA脂筏的新型色譜固定相，建立了一種TrkA脂筏色譜新模型；2.以TrkA脂筏固定相為填料製備色譜柱，通過測定吉布斯自由能，描述熱力學行為，研究了TrkA脂筏色譜固定相的色譜保留特性，初步闡明TrkA脂筏色譜的保留機理；3.運用TrkA脂筏色譜模型對71種中藥進行活性部位篩選，結果表明：葶藶子、大風子等13種中藥在TrkA脂筏固定相中有保留；4.選擇TrkA高表達的神經膠質瘤細胞株U251，通過考察細胞增殖及細胞凋亡情況，評價TrkA脂筏固定相中有保留的中藥活性部位的抑瘤活性，結果表明：葶藶子、五倍子、大風子、合歡皮、香加皮、山豆根6種中藥材中含有抗腫瘤活性組分；5.選擇中藥葶藶子正丁醇有效提取部位，研究其抑瘤活性及其機理，體內外研究結果表明：葶藶子正丁醇有效提取部位對mcf-7、SGC、HepG-2、SCLC等多種腫瘤細胞有明顯的抑制作用，尤以mcf-7細胞的抑制作用最為明顯，而對成纖維細胞則沒有明顯毒性作用；正丁醇有效提取部位可以通過抑制PCNA、PERK表達抑制細胞增殖；有效部位可以促進細胞凋亡，作用機理為抑制bcl2、增強bax表達；有效部位還可顯著抑制腫瘤細胞的遷移；裸鼠灌胃和腹腔注射給藥組瘤塊體積明顯小於空白模型對照組，抑瘤率均高於80%，小鼠體重無明顯差異，說明葶藶子有效部位可顯著抑制移植瘤的生長，對裸鼠宿主損傷作用小；研究結果顯示：葶藶子有效部位可以多靶點抑制腫瘤生長，發揮促進凋亡、抑制增殖和遷移等多種作用，是一種高效低毒的潛在抗腫瘤中藥；6.選擇工廠化生產的食用菌產品金針菇和杏鮑菇，研究其在TrkA脂筏色譜中的保留行為，結果表明：金針菇在TrkA脂筏色譜中有保留；抗腫瘤活性研究結果表明：金針菇的活性部位對HepG2、SGC、U251和A549的抑制率明顯強於HeLa和Lovo。本課題研究結果顯示：TrkA脂筏色譜是一種具有生物親合特徵、能夠選擇性識別與TrkA受體作用的藥物或成分、可用於中藥及天然產物中抗腫瘤活性成分篩選的高選擇性、高特異性、高穩定性的生物親合色譜新模型。