《TRPM7在神經細胞缺血損傷中的作用及DREAM對TRPM7調控機制研究》是依託電子科技大學,由談頌擔任醒目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TRPM7在神經細胞缺血損傷中的作用及DREAM對TRPM7調控機制研究
- 依託單位：電子科技大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：談頌
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經元缺血損傷是腦卒中引起腦功能障礙的核心之一，NMDA 受體介導的“興奮性毒性”作用是導致損傷的重要原因，但NMDA受體拮抗劑的臨床試驗未能顯示有效。TRPM7是不依賴NMDA的通道蛋白，激活後引起細胞內Ca2+持續超載，導致惡性氧化應激。目前認為DREAM是多種通道蛋白的調控因子，相關研究和前期實驗提示梗死區DREAM和TRPM7蛋白表達均顯著增加。針對DREAM作為Ca2+結合蛋白的特性和TRPM7對Ca2+的通透性的特點，我們提出假說：二者可能存在一定的功能相關性，共同參與神經細胞缺血損傷過程。我們採用在體外培養神經元細胞中上調或下調TRPM7表達，同時套用TRPM7基因敲除小鼠，以闡明TRPM7在缺血損傷中的作用，在此基礎上探討DREAM與TRPM7的結合及對TRPM7通道生化功能特性的調控機制。本課題將進一步拓寬對中樞TRPM7通道功能的認識，為腦卒中治療藥物研發提供新靶點。
結題摘要
本研究計畫擬闡明TRPM7在神經細胞缺血損傷中的作用，探討DREAM與TRPM7是否結合及對TRPM7通道生化功能特性的調控機制。首先，我們建立了原代培養的皮層神經元的氧糖剝奪(oxygen-glucose deprivation, OGD)模型和成年大鼠MCAO（Middle cerebral artery occlusion）模型，通過分子生物技術檢測到在神經細胞缺氧時TRPM7的蛋白和mRNA均表達增加，推測TRPM7參與神經細胞缺氧損傷；進而探討TRPM7在大鼠MCAO模型再灌注72小時內的表達變化，認識到在腦缺血再灌注24-48小時之間是TRPM7的表達高峰；其次，分別使用TRPM7的抑制劑2-APB、香芹酚調控TRPM7，結果顯示可減少缺血損傷時神經元的凋亡、明顯減少梗死體積以及減輕神經功能障礙；現已探測到DREAM在神經細胞缺血損傷中的表達增加以及在神經元的表達定位，已構建TRPM7和DREAM的質粒以及它們的過表達，但二者的相互作用驗證的工作正在進行。綜上，本研究證實了抑制TRPM7可減輕腦缺血損傷並改善神經功能障礙，同時認識到TRPM7在腦缺血再灌注損傷的急性期的表達高峰的時間段，為研究靶向抑制TRPM7治療腦缺血損傷提供可能的治療依據和啟示性線索
