《STAT3誘導食管鱗癌細胞上皮間質轉化的調控機制》是依託鄭州大學，由李珊珊擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：STAT3誘導食管鱗癌細胞上皮間質轉化的調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李珊珊
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
上皮間質轉化（EMT）是惡性腫瘤浸潤轉移的重要機制之一。本項目擬探討信號轉導蛋白STAT3對食管鱗癌細胞EMT的調控作用及調控機制。將表達活化STAT3的載體STAT3-C轉染入人食管鱗癌細胞，並採用RNA干擾技術將STAT3-siRNA轉染入人食管鱗癌細胞，觀察對食管鱗癌細胞EMT的影響；在穩定高表達活化STAT3載體的食管鱗癌細胞中阻抑E-cadherin轉錄抑制因子Twist，Snail，Slug, ZEB1的活性，探討STAT3對食管鱗癌EMT的調控途徑；結合步驟二、三的結果備選出在食管鱗癌EMT時受STAT3調控的下游轉錄抑制因子，根據STAT3與下游靶基因結合的序列特點TTN4-6AA，分析下游調控基因的啟動子區，以EMSA實驗確定結合位點。建立裸鼠移植瘤模型，進一步在活體內探索STAT3在食管鱗癌EMT中的作用。為揭示食管鱗癌浸潤轉移機制，阻抑浸潤轉移發生提供新的思路。
結題摘要
本研究採用免疫組織化學、凝膠滯留實驗（EMSA）、分子生物學等方法在食管鱗癌組織、食管鱗癌細胞以及成功構建的裸鼠食管鱗癌模型中，發現：（1）信號轉導子和轉錄活化因子3（Signal transducers and activators of transcription 3，Stat3）和其活化形式p-Stat3在食管鱗癌組織中表達增高；其表達增高與食管鱗癌的浸潤轉移密切相關；且與食管鱗癌上皮間質轉化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的發生關係密切。（2）Stat3在EC-1，EC-9706兩種食管鱗癌細胞系中均不同程度表達，而在低分化食管鱗癌系EC-1細胞中表達最高。（3）在EC-1細胞中增加Stat3的表達，不僅 E-cadherin表達下降，Vimentin表達升高，而且E-cadherin的轉錄抑制因子TWIST的表達同樣升高；進一步在EC-1細胞中降低Stat3的表達，則E-cadherin 表達升高，而Vimentin和TWIST表達下降。證實Stat3通過調控TWIST的表達參與食管鱗癌EMT的發生，EMSA實驗顯示Stat3通過調控TWIST的表達是通過結合TWIST的啟動子來實現的。裸鼠體內實驗則進一步論證了體外實驗的結果。（4）在EC-1細胞中轉染Stat3-C載體增加Stat3的表達則不僅EMT的重要標誌物表達變化，且Snail的表達也隨之升高。在Stat3表達增高的EC-1細胞中降低Snail的表達，則能部分挽救Stat3表達增高引起EC-1細胞EMT的變化及相應的浸潤轉移能力。因此表明Stat3不僅通過調節TWIST的表達參與食管鱗癌的EMT發生，參與調節Snail也是其參與食管鱗癌EMT發生途徑之一。（5）IL-6刺激食管鱗癌EC-1細胞，在Sta3表達增加的同時轉錄因子Snail家族中的成員之一Slug表達同樣增加；而在經過IL-6刺激的EC-1細胞中降低Slug的表達則可同樣挽救因Stat3表達增加引起的EMT的發生。上述結果證實了我們提出的Stat3通過參與EMT參與食管鱗癌浸潤轉移的過程，並揭示了Stat3誘導食管鱗癌發生EMT的調控機制，為食管鱗癌的防治提供了新的靶點。
