《SIRT6調控心肌肥大的分子機制研究》是依託中山大學，由劉培慶擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SIRT6調控心肌肥大的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉培慶
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
心肌肥大是心血管疾病的獨立危險因素，組蛋白修飾在心肌肥大和心衰中的作用日益引起人們關注。我們利用心肌肥大模型對Ⅲ型組蛋白去乙醯化酶Sirtuins家族7個成員進行篩選發現SIRT6是變化最為明顯的亞型。在PE誘導的心肌細胞肥大模型和腹主動脈縮窄高血壓大鼠心肌肥大後期及冠脈結紮致大鼠心梗心衰模型SIRT6mRNA及蛋白表達水平明顯下降，提示SIRT6可能對心肌肥大及心衰有負性調控作用。EMSA實驗顯示PPARα激動劑非諾貝特或過表達轉錄輔激活因子PGC-1α增加了SIRT6的DNA結合活性，提示PPARs可能參與調控。本課題將進一步利用CHIP、啟動子缺失突變、報告基因等方法尋找與SIRT6相互作用且與心肌肥大密切相關的靶蛋白並探討對靶基因轉錄調節，並通過過表達突變型SIRT6造成酶活性缺失，探討SIRT6影響心肌肥大的轉錄調控機制，為確立SIRT6作為心肌肥大治療的新靶點提供充分的科學依據
結題摘要
本課題研究工作按計畫實施，順利完成。（1）首先，我們通過篩選發現Sirtuins家族成員SIRT6在心肌肥大的模型中變化最為明顯，通過構建SIRT6及其酶突變體質粒和SIRT6的RNA干擾序列，系統地研究了SIRT6對心肌細胞肥大的影響，發現過表達SIRT6的野生型質粒能夠抑制AngⅡ誘導的心肌細胞肥大，過表達其酶突變體質粒H133Y則無此效應，而在心肌細胞中特異性沉默SIRT6則能夠模擬AngⅡ的作用誘導心肌肥大的發生，進一步明確了SIRT6在心肌肥大病理過程中的重要作用；（2）在此基礎上，我們進一步利用免疫共沉澱、報告基因等方法研究SIRT6抑制心肌肥大的調控機制，發現在心肌細胞中SIRT6與NFκB催化亞基p65發生相互作用，並且這種相互作用能被AngⅡ增強；阻斷NFκB能夠抑制SIRT6基因沉默誘導的心肌細胞肥大；此外，過表達SIRT6可抑制NFκB報告基因的活性。我們已在藥理學權威雜誌British Journal of Pharmacology上發表了這一部分的研究結果，並得到了該雜誌編輯和審稿人的高度肯定；（3）作為Ⅲ型組蛋白去乙醯化酶Sirtuins家族主要特點是NAD依賴性，Nmnat2是NAD合成的限速酶。我們通過研究SIRT6的上游Nmnat2在心肌肥大中的功能及機制，發現過表達Nmnat2的野生型質粒能夠抑制AngⅡ誘導的心肌細胞肥大，且此效應依賴於其NAD合成活性。沉默了SIRT6能夠明顯逆轉Nmnat2的心肌保護作用，結果我們已經發表在FEBS Letters等雜誌上；（4）建立了腺病毒細胞轉染技術，發現心肌細胞轉染Ad-RIP140後，可抑制脂肪酸代謝、線粒體氧化磷酸化、葡萄糖代謝以及線粒體膜電位，增加細胞內自噬， 轉染PGC-1α可減弱此作用，從心肌細胞調控能量代謝調節角度解釋了SIRT6的作用，研究結果已發表在Mol Cell Endocrinol等雜誌上。 通過本課題的實施，我們揭示 了SIRT6參與心肌肥大的上下游調節機制及相關的信號分子，明確了SIRT6通過酶活性依賴性方式參與心肌肥大的抑制性調節，且與能量代謝關係密切。提示SIRT6有可能作為心肌肥大治療的潛在靶點。在SCI收錄雜誌論文發表發表標註本基金號的研究論文13篇，中文核心期刊3篇，培養博士研究生3人，碩士研究生2人，達到或超過了課題的預期目標
