《RIG-G在CRL-E3泛素連線酶活性調控中的作用研究》是依託上海交通大學，由童建華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：RIG-G在CRL-E3泛素連線酶活性調控中的作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：童建華
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
蛋白泛素化是細胞內一種重要的蛋白質修飾方式，也是細胞生理過程中一種重要的調節機制。CRLs是一類組裝在支架蛋白cullin上的多亞基E3泛素連線酶，其cullin的Neddylation-Denedyylation動態循環過程是CRLs進行循環組裝和保持活性的前提。在CRL的Deneddylation過程中CSN複合物起著重要的調控作用，對維持細胞內E3酶的蛋白水平至關重要。近年來有關CSN功能的研究日漸增多，但是針對CSN複合物活性調控的機制研究卻為數有限。申請人在前期工作中發現，干擾素誘導基因RIG-G能夠與CSN複合物中的亞單位發生相互作用，並影響後者的功能。本項目欲在此基礎上，對RIG-G在CRL-E3酶活性調控中的作用及其機制展開全面深入的研究，不但可深入挖掘RIG-G的功能，明確IFN信號通路與蛋白泛素化的關係，更可為闡明因泛素系統失調引起的疾病的分子機制奠定基礎。
結題摘要
RIG-G是本課題組多年前從早幼粒白血病細胞系NB4中克隆到的一個基因，它屬於干擾素誘導基因家族的一員，可以在多種腫瘤細胞中被干擾素快速地誘導表達。前期工作已經證明RIG-G能夠抑制腫瘤細胞增殖。在本項目中，我們發現RIG-G還可以影響COP9信號體（COP9 signalosome，CSN）複合物的功能。CSN是一個由8個亞基組成的、高度保守的複合物，具有金屬蛋白酶、去泛素化酶和磷酸激酶三種活性，它與CRL-E3泛素連線酶對底物蛋白的降解密切相關，可在多種生命活動中發揮重要作用。我們發現，RIG-G可以與CSN複合物中的CSN5亞基發生作用，改變CSN5在細胞內的正常分布，破壞CSN複合物的組成，使細胞中CSN複合物的含量下降，無法在CRL-E3酶亞基的deneddylation和deubiquitination過程中發揮正常的催化作用，導致CRL-E3酶因過度活化而發生亞基的自身降解。我們的研究顯示，RIG-G可以使CRL-E3酶的亞基cullin-1、b-TrCP等的蛋白水平明顯下降，引起CRL-E3酶的穩定性和活性下降，導致許多重要底物蛋白（如IkBa）的泛素化受抑，降解受阻。IkBa在細胞內的累積，會直接影響NF-kB信號通路的激活，進而抑制細胞增殖。另外，RIG-G還可影響CSN複合物的蛋白激酶活性，下調c-Jun蛋白的磷酸化水平，最終引起細胞內多條信號通路的紊亂。本項目通過深入研究RIG-G在CRL-E3酶活性調控中的作用，進一步挖掘了RIG-G的生物學功能，揭示了RIG-G與蛋白泛素化之間的關係，為闡明因泛素系統失調引起的疾病的分子機制奠定了基礎，同時對進一步理解CSN複合物有可能成為腫瘤診斷和治療的潛在靶標也具有重要意義。此外，我們以前曾報導了一種有別於經典JAK-STAT途徑的新的干擾素信號傳遞方式，即STAT2和IRF-9能夠不依賴STAT1發生相互作用，形成複合物，誘導RIG-G的表達。在本項目中，我們繼續對RIG-G基因的表達調控機制展開深入的研究，發現雖然RIG-G基因的表達不必依賴經典的JAK-STAT途徑，但是後者的激活能明顯增強STAT2/IRF-9複合物或IRF-1對RIG-G的誘導表達作用，進一步在分子機制上闡明了干擾素和維甲酸兩條信號途徑之間的協同作用，這一結果目前已發表在國際學術雜誌Exp Cell Res上。
