《MicroRNA-19a/b通過正反饋環路促進胃癌細胞轉移的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由吳瓊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA-19a/b通過正反饋環路促進胃癌細胞轉移的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：吳瓊
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
惡性腫瘤轉移的調控機制尚未完全闡明。我們在國際上率先發現：miR-19a/b的高表達與胃癌轉移正相關；miR-19a/b能促進胃癌細胞的體內外轉移；MXD1是miR-19a/b的靶基因；MXD1的高表達能抑制c-Myc和miR-19a/b的表達並阻遏胃癌惡性表型的發生。文獻回顧提示：c-Myc能直接轉錄激活miR-19a/b；MXD1能直接或間接拮抗c-Myc的功能；上述分子均與腫瘤轉移相關。我們推測，c-Myc-miR-19a/b-MXD1組成的環路可能參與了胃癌的轉移。本項目擬先明確上述分子在胃癌轉移細胞和組織中的表達規律，再利用基因轉染分別調變它們的表達，通過體內外轉移實驗闡明它們對胃癌轉移的調控，並藉助報告基因實驗、免疫共沉澱、western blot、PCR等明確上述正反饋環路的存在及其對胃癌轉移的調控機制，為明確miRNA對胃癌轉移的調控作用及機制提供理論依據。
結題摘要
腫瘤轉移是惡性腫瘤患者死亡的主要原因，但是其調控機制仍未完全闡明。MicroRNA是一類在轉錄後水平調控靶基因蛋白表達的非編碼小RNA分子，它們在惡性腫瘤轉移的發生過程中發揮了重要的調控作用。我們前期對miR-17-92與胃癌惡性表型進行研究時發現miR-17-92成員miR-19a/b的表達與胃癌患者淋巴結和遠處轉移密切相關，miR-19a/b能夠促進胃癌細胞的體內外侵襲和遷移能力，並且通過靶基因MXD1發揮功能；進一步研究發現MXD1能夠抑制胃癌細胞惡性表型的發生，影響miR-19a/b的體外侵襲能力，並能夠抑制miR-19a/b及miR-19a/b的上游轉錄因子c-Myc的表達。此外，利用本實驗室前期從胃癌親本細胞SGC7901和MKN28中篩選出的兩株轉移能力不同的細胞（SGC7901高轉移潛能細胞和低轉移潛能細胞、MKN28高轉移潛能細胞和低轉移潛能細胞）研究胃癌腫瘤微環境的過程中，我們發現SGC7901和MKN28高低轉移胃癌細胞均能夠分泌外泌體，高轉移胃癌細胞分泌的外泌體能夠促進低轉移胃癌細胞的轉移、侵襲、發生上皮間質轉化(EMT)，這一功能可能通過激活低轉細胞的NF-κB通路實現；進一步利用miRNA晶片篩選高轉移胃癌細胞和低轉移胃癌細胞的miRNA表達差異，發現在高轉移胃癌細胞內表達上升兩倍的miRNA中，有三個miRNA（miR-17-5p，miR-20a-5p，miR-19b-3p）屬於miR-17-92基因簇。進一步研究發現，高轉移胃癌細胞分泌的外泌體攜帶miR-17-92基因簇能夠通過靶向PTEN，激活AKT，從而激活NF-κB通路來發揮促進低轉移胃癌細胞轉移的功能。本研究表明miR-17-92基因簇能夠通過c-Myc－miR-19a/b－MXD1—c-Myc環路促進胃癌細胞的轉移；並且miR-17-92基因簇能夠通過激活NF-κB通路在惡性程度較強的胃癌細胞分泌的外泌體內發揮促進惡性程度較弱的胃癌細胞的轉移能力；說明miR-17-92基因簇有可能作為預測胃癌轉移的標誌物，甚至可能作為防治胃癌轉移的靶標。本項目的研究結果有助於進一步揭示胃癌轉移發生的分子機理，明確miRNA在胃癌轉移中的相關功能及機制，對於理解胃癌轉移發生和研究新的預防治療策略具有重要意義。
