IPS細胞調節培養基抑制增生性瘢痕的機制研究

《IPS細胞調節培養基抑制增生性瘢痕的機制研究》是依託上海交通大學，由鄧辰亮擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：IPS細胞調節培養基抑制增生性瘢痕的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：鄧辰亮
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

增生性瘢痕的治療一直是一個亟待解決的問題。過度的炎症反應與組織纖維化已被證實在瘢痕增生過程中扮演著的重要角色。我們在前期的研究中發現iPS細胞條件化培養液（iPS cell-conditioned medium , iPSCM）能減輕多種組織纖維化，並抑制局部炎症反應。然而，目前缺乏iPSCM用於瘢痕治療的相關機制研究。本研究中，我們擬通過質譜分析對所收集的iPSCM進行質量控制。並將經質控的iPSCM用於增生性瘢痕動物模型與體外瘢痕成纖維細胞與單核細胞共培養體系，採用慢病毒MCP-1基因過表達及siRNA干擾，表達譜晶片分析、免疫螢光染色、ELISA、Real time PCR、Western blot等方法，探索MCP-1分子在iPSCM抑制增生性瘢痕發生過程中,調控微環境炎症和纖維化水平的細胞及分子機制，並為控制瘢痕增生提供新方法和理論依據。

結題摘要

我們在本期的研究中發現iPS細胞條件化培養液（iPS cell-conditioned medium , iPSCM）能減輕多種組織纖維化，並抑制局部炎症反應。iPSCM用於體外瘢痕成纖維細胞與單核細胞共培養體系後，瘢痕成纖維細胞與單核細胞粘附下降，採用MCP-1基因siRNA干擾，可抑制增生性瘢痕中的炎症反應。然而，當我們在瘢痕動物模型體內套用該方法，並未發現MCP-1基因能明顯抑制瘢痕增生及纖維化。增生性瘢痕的過度纖維化，是增生性瘢痕的另一研究重點，研究表明促纖維化的M2巨噬細胞有助於增生性瘢痕的形成。還研究表明，chrfam7a能抑制M2型巨噬細胞的形成。通過qPCR和組織晶片檢測，我們發現在增生性瘢痕臨床標本中chrfam7a表達較非增生疤痕明顯降低。接受皮膚移植的SCID小鼠被隨機分為chrfam7a基因轉染組和對照組。同時，chrfam7a基因轉染組使用慢病毒系統。疤痕的形成，研究在2, 4例移植皮膚的巨噬細胞浸潤和炎症相關因子，8周后。移植的皮膚從對照組發達肥厚性瘢痕而移植的皮膚從chrfam7a轉染組痊癒顯著減少纖維化和M2巨噬細胞浸潤。M2型巨噬細胞局部注射促進瘢痕纖維化又在chrfam7a轉染組。有趣的是，炎症是通過上調M1型巨噬細胞誘導TNFα，IL-6表達的提升，在chrfam7a轉染組2周后。我們的研究結果表明，chrfam7a可以有效地防止通過巨噬細胞表型轉化的調控增生性瘢痕的形成。免疫刺激療法是改善疤痕質量的一個更好的選擇。