GST pull-down assay

GST pull-down實驗是一個行之有效的驗證酵母雙雜交系統的體外試驗技術,近年來越來越受到廣大學者的青睞。

其基本原理是將靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巰基轉移酶）融合蛋白親和固化在谷胱甘肽標記的磁珠上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液與之孵育,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結合物後通過SDS-PAGE電泳分析,從而證實兩種蛋白間的相互作用或篩選相應的目的蛋白,“誘餌蛋白”和“捕獲蛋白”均可通過細胞裂解物、純化的蛋白、表達系統以及體外轉錄翻譯系統等方法獲得。此方法簡單易行,操作方便。　GST：谷胱甘肽巰基轉移酶(glutathione S-transferase)

GST pull-down技術