《GPR160調控結核桿菌入侵宿主巨噬細胞的分子機制研究》是依託同濟大學，由楊華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：GPR160調控結核桿菌入侵宿主巨噬細胞的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊華
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鑑定和分析結核菌入侵宿主免疫細胞過程中關鍵的免疫調控因子對研究結核病循再她發病機制、開發新的治療和預防手段十分重要。G蛋白偶聯受體（GPCR）參與調控機體各種生理和病理活動，但在結核菌入侵機體中作用尚未見報導。本項目前期研究發現：（1）屬於A類GPCR的一個孤兒受體GPR160，在結核病人外周血單核細胞的表達水平明顯低於正常人；（2）結核菌H37Rv感染早期明顯下調巨噬細胞GPR160的表達；（3）GPR160突變巨噬細胞更容易被BCG入侵；（4）GPR160突變鼠經BCG感染後，荷菌量顯著高於對照鼠，抗酸桿菌大量聚集分布,均提示GPR160可能參與結核菌入侵宿主巨噬細胞的過程，並發揮保護作用。本項目將從分子、細胞、動物感染、SNP檢測等水平，分析結核菌調控GPR160表達及GPR160調控結核菌入侵巨噬細胞的作用和機制，進而檢測GPR160對結核菌致病力的影響，為結核病發病機制研究提供新思路。
結題摘要
結核分枝桿菌可入侵宿主巨噬細胞，調控機體免疫應答，從而逃避宿主免疫監視和藥物攻擊。G蛋白耦聯受體（GPCRs）廣泛地參與細胞的各類生理和病理活動的調控，但其在結核分枝桿籃享盼菌入侵宿主細胞中的功能尚不明確。本室前期工作發現在BCG感染的巨噬細胞中，一種GPCR家族的判罪炒船孤兒受體――GPR160的mRNA和蛋白表達水平早期顯著上調。在此基礎上，本項目從4個方面開展了研究：分枝桿菌如何調控GPR160的表達，GPR160調控分枝桿菌入侵宿主巨噬細胞的作用和機制，GPR160對分枝桿菌感染致病力的影響，GPR160對巨噬細胞吞噬非分枝桿菌的作用。結果發現，分枝桿菌通過其主要毒力因子LPS,PGN早期上調GPR160表達。從GPR160突變鼠分離的腹腔巨噬細胞進行BCG感染實驗，與對照細胞相比，BCG入侵水平顯著下調，通過特異性siRNA沉默以及淚蜜小鼠感染實驗，均獲得相同結果。與對照細胞相比，BCG誘導GPR160突變巨噬細胞ERK信號分子的磷酸化水平顯著下調。通過特異性抑制旋頌簽劑或siRNA抑制ERK的表達，也可顯著下調BCG的入侵。動物感染實驗發現GPR160突變小鼠被BCG感染後，才榜員荷菌量低於對照鼠，病理切片也明顯減輕。進一步研究還發現，GPR160突變巨噬細胞對大腸桿菌和土拉桿菌的吞噬水平也顯著下調。上述研究結果均提示，GPR160可通過上調ERK信號通路在BCG入侵宿主巨噬細胞的過程中發揮重要的調控作用。研究結果為探討結核病的發病機制以及GPCR在結核感染免疫甚至慢性感染性疾病中的作用提供新的思路和基礎，為以GPCRs為藥物靶點，開發新的抗結核藥物提供了理論依據鑽故紋迎。
