GEBP11短肽抑制胃癌血管生成的分子機制

《GEBP11短肽抑制胃癌血管生成的分子機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由梁樹輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：GEBP11短肽抑制胃癌血管生成的分子機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：梁樹輝
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

腫瘤血管生成在腫瘤的發生髮展中具有極其重要的作用，深入闡明腫瘤血管生成的分子機制、明確發揮重要作用的關鍵分子，對於腫瘤血管抑制治療有重要意義。我們通過噬菌體肽庫篩選得到胃癌血管內皮細胞特異結合短肽GEBP11（已獲專利）。研究發現，GEBP11短肽具有抑制胃癌血管生成的作用，這種作用可能是通過抑制內皮細胞的粘附、遷移實現的，但其具體機制尚不清楚。本課題擬通過血管生成相關實驗，全面分析GEBP11與胃癌血管生成的相關性，明確它在胃癌血管生成中的功能；利用Western blot、RT-PCR、蛋白質雙向電泳、基因晶片等方法，分析GEBP11作用後血管生成相關分子群表達的變化，為EGBP11抑制胃癌血管生成的可能機制提供線索；通過蛋白質免疫共沉澱、質譜分析等技術分離鑑定GEBP11的受體，並與GEBP11干預後表達異常的分子群相關聯，探討GEBP11及其受體參與胃癌血管生成調節的分子機制。

結題摘要

深入闡明腫瘤血管生成的分子機制、明確發揮重要作用的關鍵分子，對於腫瘤血管抑制治療有重要意義。我們通過噬菌體肽庫篩選得到胃癌血管特異結合短肽GEBP11，研究發現，GEBP11 短肽具有抑制胃癌血管生成的作用，但其具體機制尚不清楚。本項目計畫從四方面展開研究：GEBP11 短肽與胃癌血管生成的相關性、GEBP11 作用後血管生成相關分子群表達變化、GEBP11 短肽結合受體的分離鑑定、GEBP11及其受體參與胃癌血管生成調節的分子機制。項目執行基本按照申請書研究目標和計畫開展工作，總體進展順利，除受體鑑定部分工作遇到困難並進行了技術方案改進外，基本完成研究任務，實現預期研究目標。本項目發表論文8篇（其中SCI兩篇，IF計8.409），獲得國家發明專利授權1項，獲得省科學技術進步一等獎1項、省自然科學優秀論文二等獎1篇，獲省科學技術鑑定登記成果1項，全國消化病大會錄用投稿5篇（其中發言1篇），培養研究生5名。 本項目主要研究進展有：（1）證實GEBP11的受體表達於某些腫瘤組織血管和一些低分化胃癌細胞系，而在正常組織血管無表達。GEBP11結合受體亞細胞定位於胞膜及核周胞漿，與其受體結合後可被內化入胞內。GEBP11可在體外、體內抑制Matrigel中的內皮細胞形成管狀結構，可抑制荷瘤裸鼠胃癌組織中的血管生成。（2）GEBP11作用於胃癌血管內皮細胞可引起多種基因表達變化，其中多種差異表達基因參與血管生成、腫瘤、粘附、運動等生物過程調控，部分差異基因在血管生成的各環節中發揮了重要作用。（3）初步探討了GEBP11短肽抑制胃癌血管生成的分子機制：GEBP11短肽結合於內皮細胞，通過內化作用進入胞內或直接通過膜表面受體，對KDR、MMPs、Bcl-2/Bax、CAMs等分子發揮明顯的負性調控作用，致使ECs增殖受抑、凋亡誘導增加，同時降低其基質降解、遷移、粘附能力，進而抑制血管生成。（4）通過免疫共沉澱-質譜分析法，獲得了12個GEBP11短肽結合受體候選分子，其中，ZCCHC11經短肽處理後表達上調約3倍，是可能性較大的受體分子之一。但經多次嘗試，重複性尚不理想，短肽分子量較小、親和力較低可能是其重要的原因。項目組已改進技術方案，選用PEG修飾技術，成功製備多聚短肽，進而分離鑑定其結合受體的工作正在進行中。