EPO激活PI3K/Akt信號通路調控梗阻性腎病AQP2表達機制的實驗研究

《EPO激活PI3K/Akt信號通路調控梗阻性腎病AQP2表達機制的實驗研究》是依託鄭州大學，由文建國擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：EPO激活PI3K/Akt信號通路調控梗阻性腎病AQP2表達機制的實驗研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：文建國
• 依託單位：鄭州大學

項目摘要

先天性輸尿管不全梗阻性腎積水是兒童終末腎病原因之一。研究顯示梗阻腎臟水通道蛋白2（AQP2）表達下調與梗阻腎臟尿液濃縮功能受損有關。梗阻解除後腎臟已經下調的AQP2不能馬上恢復。如何預防梗阻腎臟AQP2下調和促使解除梗阻腎臟下調的AQP2恢復是臨床有待解決的問題。本課題組前期研究發現促紅細胞生成素（EPO）可以有效抑制幼鼠梗阻腎臟AQP2下調和促使解除梗阻的腎臟AQP2恢復。文獻報導三磷酸醯肌醇蛋白激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信號通路能調控鼠集合管細胞系AQP2合成和向細胞膜轉運。EPO是否通過該信號通路調節梗阻腎臟AQP2表達有待進一步研究。本研究擬採用免疫組化、RT-PCR、雷射共聚焦顯微鏡和電鏡等技術，在新生鼠和幼鼠梗阻腎臟模型研究EPO調控AQP2的轉運過程，並在體外細胞中進一步驗證EPO調控AQP2表達的機制。為進一步研究梗阻性腎病EPO干預AQP2調控機制提供參考。

結題摘要

尿路梗阻是終末型腎衰竭的一個重要原因。本研究探討了大鼠單雙側雙尿管梗阻及解除梗阻後4W內大鼠腎臟的功能及腎臟水通道蛋白和Na/K-ATPase的變化。結果顯示單側輸尿管梗阻48h及雙側輸尿管梗阻24h顯著影響腎臟水通道蛋白（AQPs）和Na/K-ATPase的表達，在梗阻解除後的4W內腎臟濃縮功能和鈉的重吸收功能並不能完全恢復。促紅細胞生成素（EPO）臨床已用於新生兒缺血缺氧性腦病的研究，對腎性貧血患者也有較好的療效。大量的動物研究發現EPO除了促造血功能，還有抗炎抗纖維化等作用。在本研究中我們在輸尿管梗阻解除時用EPO對其進行不同時間的干預，用藥時間分別為解除梗阻後1W、2W、3W和4W，發現EPO能夠促進梗阻解除後腎臟功能和腎臟水通道蛋白和Na/K-ATPase表達的恢復。腎臟水通道蛋白在腎臟濃縮功能方面發揮重要的作用，Na/K-ATPase可以為腎臟水的重吸收提供動力，所以EPO對AQPs和Na/K-ATPase的保護作用也是其發揮腎臟保護作用的機制之一。體外實驗，我們用EPO對腎臟集合管細胞進行干預，發現EPO能夠通過PI3K、AKT信號通路上調AQP2的表達。腎臟纖維化也是許多腎臟疾病發展過程中一個常見的病理變化，在本研究中我們也對梗阻解除後腎臟纖維化的變化進行了相關檢測，發現梗阻解除後短時間內（3d）腎臟纖維化並不明顯，隨著時間的延長，梗阻解除後2W內纖維化逐漸加重。我們用EPO對梗阻大鼠進行干預，發現EPO能夠促進梗阻解除後腎臟纖維化的恢復。我們對人胎兒發育時期腎臟水通道蛋白的表達規律進行了研究，發現隨孕周的增加，胎兒腎臟AQP1-4的表達也逐漸增加。同時我們收集不同孕期的羊水，並對其中的AQP2進行檢測，發現羊水中的AQP2的表達與胎兒腎臟中AQP2的表達具有良好的相關性。在該基金的資助下，完成和在國際國內雜誌發表相關論文和著作18篇。