A群鏈球菌糖蛋白疫苗的設計、合成與免疫活性研究

《A群鏈球菌糖蛋白疫苗的設計、合成與免疫活性研究》是依託山東大學，由顧國鋒擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：A群鏈球菌糖蛋白疫苗的設計、合成與免疫活性研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：顧國鋒
• 依託單位：山東大學

中文摘要

A群鏈球菌（GAS）是人類主要的病菌感染源，約90%的鏈球菌感染疾病是由GAS所致，其中以兒童和青少年感染為主。然而，迄今為止國內外還未研製出一種安全有效GAS疫苗。發展安全有效的A群鏈球菌疫苗對於GAS感染疾病的預防和治療具有非常重要的意義，是當前科研工作者們關注的熱點科學問題。近年來，有關糖蛋白疫苗的研發工作成為國際上糖科學家們從事的熱點課題，並且已經有許多種基於病原菌表面多糖抗原分子為基礎的糖蛋白疫苗實現商業化。本申請課題擬以A群鏈球菌細胞壁多糖抗原相關的GAS活性寡糖片段為研究對象，通過對其D-氨基葡萄糖結構單元進行N-醯基衍生化來合成新型異源性結構GAS寡糖半抗原，以及利用原核表達體系製備具有免疫原性但同時喪失細胞毒性的重組C5a肽酶蛋白，進而以重組C5a肽酶蛋白作為GAS寡糖半抗原的免疫原性載體蛋白，來製備新型的GAS寡糖-C5a肽酶蛋白共價結合疫苗，進行動物免疫活性篩選工作。

結題摘要

A群鏈球菌（GAS）是一類重要人類病原體，能夠引發從輕度性咽炎到致命性壞死性筋膜炎、中毒性休克綜合徵等感染疾病，甚至產生如風濕熱、風濕性心臟病等嚴重後遺症。迄今為止，有關GAS疫苗研製工作一直是國際上研發難題，是科研工作者們熱切關注的熱點問題。糖蛋白共價結合疫苗在預防和治療細菌性感染疾病方面取得成功。然而，糖蛋白結合疫苗研發麵臨的主要科學問題在於如何提高糖分子的免疫原性。通常有效的解決措施是使用異源性的糖抗原分子或新型免疫載體蛋白。本項目以A群鏈球菌細胞壁多糖抗原相關的GAS活性寡糖片段為研究對象，通過對其D-氨基葡萄糖結構單元進行N-醯基衍生化來合成新型異源性結構GAS寡糖半抗原，以及利用原核表達體系製備具有免疫原性但同時喪失細胞毒性的重組C5a肽酶蛋白作為新型免疫原性載體蛋白，來製備新型GAS寡糖-C5a肽酶蛋白共價結合候選疫苗，用於小鼠免疫活性評價。我們採用“2+X”收斂型合成策略，高效地合成了系列N-醯基（乙醯基、丙醯基、丁醯基等）衍生化的異源性GAS寡糖半抗原；同時通過對C5a肽酶的關鍵催化活性位點進行定點突變獲得系列C5a重組蛋白，對重組蛋白進行C5a肽酶活性檢測，發現其H193位點的點突變C5a重組蛋白(△ScpA193)完全喪失了細胞毒性，可用作新型免疫載體蛋白。以方酸二乙酯為連線臂，將N-醯基衍生化的GAS寡半抗原與重組蛋白△ScpA193連線起來，製備了系列新型N-醯基衍生化GAS寡糖-△ScpA193蛋白共價綴合物，作為候選結合疫苗用於小鼠免疫活性評價試驗。