8-溴-7-甲氧基白楊素靶向肝癌幹細胞Twist信號作用機制

《8-溴-7-甲氧基白楊素靶向肝癌幹細胞Twist信號作用機制》是依託湖南師範大學，由曹建國擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：8-溴-7-甲氧基白楊素靶向肝癌幹細胞Twist信號作用機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：曹建國
• 依託單位：湖南師範大學

項目摘要

腫瘤幹細胞是腫瘤發生、復發、轉移和耐藥的根源。我們的研究表明，8-溴-7-甲氧基白楊素(BrMC)抑制源自肝癌細胞系SMMC-7721的CD133+細胞腫瘤球形成和裸鼠皮下成瘤能力，下調Twist蛋白表達。本項目用螢光標記抗CD133和抗CD44抗體FACS分選人肝癌細胞系(SMMC-7721、Bel-7402和Huh-7)和原發性肝細胞癌(HCC)組織中的肝癌幹細胞(LCSCs)，進一步研究BrMC調節LCSCs功能和特性作用；探討BrMC對LCSCs的Twist信號傳導以及LCSCs功能和特性的調控作用機制。本研究將有助於我們更深入理解BrMC抗肝癌作用分子機制以及Twist信號傳導對LCSCs功能和特性的調節作用，為鑑別BrMC抗腫瘤作用靶標、開發和研製有效防治HCC的藥物提供重要實驗和理論依據。

結題摘要

Twsit是肝癌幹細胞上皮-間充質轉化(EMT)和腫瘤幹細胞表型的主要調節轉錄因子。8-溴-7-甲氧基白楊素(BrMC)為項目主持人自主設計和合成的具有抗腫瘤活性的白楊素新型類似物。項目研究以無血清幹細胞培養基懸浮培養為基礎，結合抗CD133抗體免疫磁球分選和原發性肝細胞癌細胞培養從建立細胞系(SMMC-7721、MHCC97H)以及原發性肝細胞癌標本獲得2種細胞系CD133+球細胞和2種細胞系球細胞、原發性肝細胞癌球細胞，分別鑑定為肝癌幹細胞(LCSCs)和肝癌乾樣細胞(LCSLCs)的模型。項目研究證實：(1) LCSCs和LCSLCs高表達 Twsit1，Twist1促成和維持LCSCs和LCSLCs EMT和自我更新、侵襲和致瘤能力；(2) 高表達Twsit1激活Akt和β-catenin信號傳導通路；(3) LCSCs和LCSLCs的Twsit1表達受到LCSCs和LCSLCs以及肝癌幹細胞微環境分泌的細胞因子IL-6、IL-1β、HGF和CCL2誘導的STAT3、CK2、HIF-1α和NF-κB信號傳導的調控； (4) BrMC通過抑制STAT3磷酸化活化下調Twsit1表達、抑制CK2α表達和CK2活性降低Twsit1磷酸化水平促進Twsit1泛素/蛋白酶體降解和抑制NF-κB(p65)表達降低Twsit1轉錄活性等多種方式逆轉IL-6、IL-1β、HGF和CCL2單獨或聯合誘導的LCSLCs EMT和腫瘤幹細胞樣特性。(5) BrMC通過降低HIF-1α穩定性降低Twsit1表達水平抑制肝癌相關星狀細胞CCL2和HGF釋放,進而抑制肝癌相關星狀細胞條件培養基誘導肝細胞癌幹細胞樣特性。我們的研究結果闡釋了Twsit高表達及其表達調控在肝細胞癌發病機制中的重要作用以及BrMC靶向肝癌幹細胞和肝癌幹細胞微環境Twsit信號傳導及其表達調控治療肝細胞癌的新藥物作用機制。