《鼠疫菌基因調控網路重塑及毒力進化》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由楊瑞馥擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：鼠疫菌基因調控網路重塑及毒力進化
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：楊瑞馥
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鼠疫菌曾經給人類造成了深重災難；目前，仍威脅著人類健康和社會穩定。該菌在從假結核菌祖先演化而來的進程中，基因調控網路的重塑對鼠疫菌的宿主適應和毒力發揮著不可取代的作用。本研究針對鼠疫菌進化中毒力相關基因調控網路的重塑及其在該菌致病機制中的作用開展研究，敲除關鍵的毒力相關轉錄調控子基因後，通過生物和動物實驗分析各突變株的生化、代謝和毒力表型；通過比較轉錄組分析，鑑定各調控子的調控元，並進一步用引物延伸、凝膠阻滯、LacZ報告基因融合、DNase I足跡等鑑定各調控子調控的精細分子機制；通過比較研究典型的對人致病和非典型的對人不致病的鼠疫菌及其祖先假結核菌（三者屬於鼠疫菌進化的三大分枝）中重要調控子直接調控的毒力相關基因的差異，探究鼠疫菌的宿主適應力和致病力是如何演化而來的，為認識該菌致病機制及其進化奠定理論基礎。該研究將為我們認識致病菌的演化和所致疾病的科學防治奠定理論基礎。
結題摘要
本研究採用“Top-Down”的研究策略。敲除所有編碼鼠疫菌整體調控子的基因，通過平板褶皺實驗、結晶紫半定量檢測實驗、線蟲蟲卵發育實驗、小鼠毒力等表型實驗驗證各調控子的功能。通過比較轉錄組分析、比較蛋白質組分析、LacZ融合實驗、引物延伸、凝膠阻滯、DNase I 足跡等實驗技術，研究明顯影響鼠疫菌生物膜或毒力表型的整體調控子所控制的調控元，並深入探究各調控子是如何直接調控各靶基因。最後，構建與鼠疫菌生物膜和毒力相關基因調控網路。本研究的完成為了解鼠疫菌傳播機理和預防控制奠定理論基礎。
