高效液相色譜方法是在經典液相柱色譜(即以液體作流動相的柱色譜法)的基礎上發展起來的一種新的色譜分析方法。由於它採用了平均粒徑為3～10μm且分布窄的高效固定相，因而獲得每米達數千甚至上萬塊理論塔板的分離能力。為了獲得較高的流速(1～2ml/min)，流動相必須用高壓泵輸送，因此又叫高壓液相色譜法。按照固定相的聚集狀態可分為液—固色譜法和液—液色譜法;按分離的機理可分為吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜法和空間排斥色譜法;按照兩相的相對極性的大小又有正相色譜法和反相色譜法之別。
目前套用最廣泛的是以鍵合矽膠為固定相、以甲醇—水或乙腈—水為流動相的反相高效液相色譜法。常用的檢測器有折光檢測器、紫外一可見分光光度檢測器、螢光檢測器、電導檢測器等。與氣相色譜法相比，它的主要優點是可以在較低的溫度下操作，除氣體和揮發性液體物質以外，所有可溶於溶劑中的化合物均可作為液相色譜的樣品，尤其對那些不適於氣相色譜分析的熱不穩定性物質、離子性物質和高分子量物質的分析更有實際意義。在工業原料、農藥、染料、維生素、胺基酸、核酸、藥品、天然有機物、生物樣品、生物體代謝物、血液和血清、合成高分子等樣品的分析中得到了廣泛的套用。
