銅調控蛋白CopC探究

內容簡介

本書詳細介紹了CopC蛋白的結構特點、穩定性、Cu（Ⅱ）轉運特點、兩位點協同性及蛋白結合其他金屬離子的性質特點，為揭示存在高氧化質膜空間的銅伴侶執行抗銅功能提供了科學依據。

本書適用於化學、生物及相關交叉學科的從業人員以及相關專業高等院校高年級學生、研究生參考。

圖書目錄

第1章銅調控體系及銅蛋白家族

1.1銅在生物體內的必要性和毒性2

1.1.1銅在生物體內的必要性2

1.1.2銅的氧化損傷3

1.2銅穩態機理4

1.2.1細胞對銅的吸收4

1.2.2細胞內銅離子的運輸載體6

1.3革蘭氏陰性菌的銅抑制體系8

1.4Cop家族9

1.4.1CopC溶液結構10

1.4.2CopC晶體結構及銅配位情況14

參考文獻19

第2章突變體MCopC的構建、表達、純化

2.1MCopC的構建26

2.1.1基因體外定點突變主要方法及原理26

2.1.2MCopC的構建29

2.2MCopC的誘導、表達33

2.2.1誘導表達33

2.2.2菌體的破碎33

2.2.3蛋白濃度測定(考馬氏亮藍G250測定法)33

2.3MCopC的純化33

2.3.1離子交換柱層析原理33

2.3.2DE-52纖維素陰離子交換樹脂的處理34

2.3.3洗脫34

2.3.4凝膠柱層析原理35

2.4MCopC的檢驗35

2.4.1TriGly SDSPAGE分析35

2.4.2紫外譜的測定36

2.4.3凝膠色譜及質譜分析38

2.5結論39

參考文獻39

第3章CopC色氨酸殘基的特性

3.1CopC的螢光特徵42

3.1.1不同激發波長下的CopC螢光42

3.1.2突變CopC的螢光42

3.1.3異於Burstein分類的蛋白44

3.1.4CopC晶體結構中色氨酸的位置44

3.2酪氨酸和色氨酸間的能量轉移45

3.3色氨酸在CopC中所處的環境47

3.4色氨酸突變對蛋白性質的影響48

3.4.1色氨酸突變對Cu(Ⅱ)結合能力的影響48

3.4.2色氨酸突變對構象影響51

3.4.3色氨酸突變對蛋白熱穩定性的影響52

3.5結論54

參考文獻55

第4章CopC穩定性

4.1GuHCl引起的CopC變性58

4.2兩態模型60

4.2.1光譜參數變化60

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