重組鈣網蛋白激活調節性B細胞及機制研究

《重組鈣網蛋白激活調節性B細胞及機制研究》是依託蘇州大學，由洪超擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：重組鈣網蛋白激活調節性B細胞及機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：洪超
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

B細胞是機體免疫系統的重要組成部分，除了產生體液免疫應答，還發揮重要的免疫調節作用，大量研究證明體記憶體在一群對免疫應答發揮負性調節作用的B細胞，即調節性B細胞。IL-10是調節性B細胞活化後的標誌性細胞因子並介導其免疫調節功能的發揮，但目前尚不清楚調節性B細胞在體內的產生及激活機制。鈣網蛋白（Calreticulin,CRT）是與免疫細胞密切相關的自身蛋白質，前期的研究發現，重組CRT能夠在體外刺激B細胞增殖和分泌IL-10，推測CRT可能參與調節性B細胞在體內的激活及免疫調節功能的發揮。擬研究重組CRT對調節性B細胞在體內外的誘導、擴增的影響；以腹腔給藥重組CRT體內激活調節性B細胞的方式檢測對機體細胞和體液免疫應答的抑制作用；並重點研究CRT激活調節性B細胞的分子機制：關鍵功能結構域和信號通路。從而理解調節性B細胞在體內的產生、激活，以及發揮免疫調節功能的規律。

結題摘要

鈣網蛋白（CRT）是內質網中的經典蛋白質，但是在病理情況下也可以出現在細胞外環境中。可溶性CRT出現在類風濕關節炎（RA）病人的血液和關節液中，並且其濃度和疾病活動度呈正相關，提示CRT可能在自身免疫紊亂的發生髮展中起作用。我們前期的研究發現，原核重組表達的CRT片段39-272（rCRT/39-272）具有重要的免疫生物學活性，對小鼠T細胞沒有直接的刺激作用，但卻可以強烈激活小鼠B細胞，刺激其增殖和分泌IL-10。腹腔注射rCRT/39-272可以抑制C57BL/6小鼠實驗型自身反應性腦脊髓膜炎（EAE）的發生，干擾體內自身抗原反應性Th1/Th2細胞的平衡。我們推測rCRT/39-272可能激活了產生IL-10的調節性B細胞（Breg），從而發揮了對T細胞免疫應答的免疫調節作用。本課題對這一假說進行了驗證，研究發現，rCRT/39-272可以直接激活並擴增具有CD1dhiCD5+表型的Breg細胞，刺激其分泌IL-10，並且可以促進其進一步向抗體分泌細胞（ASCs）分化，上調漿細胞特異的轉錄因子xbp1，irf4和blimp1的表達並下調pax5和bcl6的表達；rCRT/39-272對CD1dhiCD5+Breg細胞的激活依賴於CD14/TLR4通路；rCRT/39-272激活的CD1dhiCD5+Breg細胞在體外可以促進初始T細胞向Th2細胞分化；腹腔注射rCRT/39-272可以抑制EAE小鼠自身抗原MOG35-55特異性Th1細胞的分化；過繼轉移rCRT/39-272激活的CD1dhiCD5+Breg細胞可以抑制小鼠EAE的發病。本研究揭示出可溶性rCRT/39-272具有重要的免疫調節活性，可以通過激活CD1dhiCD5+Breg細胞產生IL-10並誘導其進一步分化為ASCs（產生多反應性的自身抗體），進而調節T細胞介導的炎症性免疫應答，提示病理情況下出現在體液中的可溶性CRT可能在體內發揮重要的免疫調節作用。