《通過抑制Fli-1的轉錄活性探討其在腫瘤發生中的作用》是依託吉林大學，由崔久嵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：通過抑制Fli-1的轉錄活性探討其在腫瘤發生中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：崔久嵬
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Fli-1（Friend leukemia virus integration 1） 屬於Ets(E26 transformation-specific)家族的轉錄因子，越來越多的研究顯示Fli-1在多種腫瘤發生髮展、腫瘤新生血管生成等過程中扮演重要角色，提示其可能是一個良好的治療靶點，但該基因的分子作用機理仍不明確。本項目以前期工作為基礎，利用Fli-1高表達細胞系，降低Fli-1的表達或抑制其轉錄活性，觀察細胞生物學功能變化，結合micro-array的方法及EMSA、CHIP和螢光素酶分析方法篩查Fli-1的靶基因，利用動物成瘤實驗和Fli-1條件敲除小鼠模型等，進一步驗證Fil-1基因在腫瘤發展中的作用。本項目預期研究成果將為Fli-1在腫瘤發生髮展中的作用機制的闡明及其靶基因的發現奠定實驗基礎，並為腫瘤的治療提供新的靶標。
結題摘要
本項目通過篩查Fli-1（Friend leukemia virus integration 1 ）在腫瘤中的表達譜，明確Fli-1高表達的臨床意義，並建立Fli-1干涉細胞模型，進一步通過細胞、分子、動物實驗多個水平研究Fli-1在腫瘤發生髮展中的功能與分子機制，目前已完項目預期目標。具體完成工作如下：套用免疫組化分析對Fli-1腫瘤表達譜進行篩查，發現Fli-1在尤文氏肉瘤、乳腺癌、小細胞肺癌、卵巢癌、子宮內膜癌、肝癌、淋巴瘤、基底細胞癌等多種腫瘤組織中均有表達，對表達頻率且評分較高的乳腺癌、小細胞肺癌、卵巢癌及子宮內膜癌進一步擴大樣本量進行臨床意義分析，發現Fli-1的表達水平與TNM分期及轉移呈正相關。在細胞水平上套用RNA沉默技術下調Fli-1的表達，進一步研究該基因的生物學功能及分子機制: 1. 在紅白血病細胞模型中，發現Fli-1表達下調可以明顯抑制細胞增殖並促進細胞凋亡，並揭示其靶基因為抑癌基因SHIP-1，Fli-1通過抑制SHIP-1的轉錄活性，促使紅細胞分化受阻，誘導紅白血病的發生，並進一步於SHIP-1敲除小鼠體內驗證了這一功能及機制. 2. 在實體瘤細胞模型中，分別於乳腺癌及小細胞肺癌中瞬時干涉Fli-1，發現下調Fli-1的表達可以明顯抑制細胞生長、促進細胞凋亡並抑制腫瘤細胞的遷移。進一步探尋其在實體瘤中發揮功能的機制，發現Fli-1參與調控Akt、Bcl-2的活性，初步闡明Fli-1促進細胞增殖及抑制細胞凋亡的分子機制。此外，在TGFβ通路中，Fli-1通過與Smad3發生蛋白質相互作用進而抑制其轉錄活性，調控Smad3下游靶基因，揭示了Fli-1參與腫瘤細胞增殖和凋亡的信號轉導機制。綜上，我們完成了對Fli-1腫瘤表達譜及其與腫瘤進展程度和轉移相關性的研究，並於細胞水平及動物水平上，闡明了Fli-1在紅白血病及實體瘤中具有促進細胞增殖，抑制細胞凋亡及促進腫瘤轉移的功能，探討了其參與調控的信號轉導通路，創新性的發現其直接調控的靶基因SHIP-1及參與調控TGFβ通路抑制Smad3的活性，不僅揭示了Fli-1在腫瘤發生髮展中的作用機制，而且為紅白血病、乳腺癌和小細胞肺癌發病機制的研究提供了有力線索。本項目揭示了新的腫瘤發生髮展機制，有助於進一步認識和防範惡性腫瘤的惡化、轉移，為開發腫瘤分子靶向治療的新靶點提供理論依據和實驗基礎。
