農藥免疫分析技術

農藥殘留的免疫分析方法是在已有免疫學實驗的基礎上建立起來的，因此它的免疫學反應原理及操作過程都與其他免疫檢測方法相類似。用於農藥殘留免疫分析反應的類型絕大多數是抗體或抗原競爭型反應。

基本介紹

• 中文名：農藥免疫分析技術
• 外文名：Pesticide immunoassay technology
• 拼音：nóng yào miǎn yì fèn xī jì shù
• 基礎：免疫學
• 反應類型：抗體或抗原競爭型反應
• 優點：特異性強

免疫分析法

免疫分析法(InununoassayIA)是一種抗體作為生物化學檢測器對化合物、酶或蛋白質等物質進行定性和定量分析的分析技術。20世紀90年代以來它在檢測糧食、水果、蔬菜、肉、奶、水和土壤中農藥的殘留分析上得到迅速發展，成為優先研究、開發和套用的一項分析技術。

免疫分析法具有特異性強、靈敏度高(檢測極限可達1～1000ng/ml)、方便快捷、分析容量大、檢測成本低、安全可靠等優點。一般不需要貴重儀器，可大大簡化甚至省去前處理過程，對使用人員的專門技術要求不高，容易普及和推廣。該技術開發的產品—檢測試劑盒，可廣泛套用於現場樣品和大量樣品的快速檢測。

因此，人們稱免疫分析技術是21世紀最具競爭性和挑戰性的檢測分析技術。

標記抗體的類型

農藥殘留的免疫分析方法是在已有免疫學實驗的基礎上建立起來的，因此它的免疫學反應原理及操作過程都與其他免疫檢測方法相類似。用於農藥殘留免疫分析上的抗體標記方法主要有4種類型，即放射性標記、酶標記、生物素標記和螢光抗體標記。早期的農藥殘留免疫分析標記抗體主要是以碘標記為主，但由於這種標記方法半衰期短，而且對環境和人有潛在的危險性，因而逐步被酶標記所替代，由此建立的方法稱為酶免疫分析法(EIA)：酶標記的抗體保存期長，具高敏感性，顯示結果直觀並可進行光譜分析，這為農藥殘留定性、定量分析帶來很大的方便。標記在抗體上的酶主要是辣根過氧化物酶、鹼性磷酸酶和S-半乳糖苷酶在檢測過程中，當加入適當的底物時產生特殊的顏色反應，用於檢測此外，生物素標記和螢光抗體標記檢測農藥殘留的套用也有不少報導。

檢測方法

用於農藥殘留免疫分析反應的類型絕大多數是抗體或抗原競爭型反應，其檢測方法有兩種：一種是抗原捕獲法，將已知量的標記抗原與含有未知量的待測抗原混合在一起，然後將該混合液與吸附在固相上的亞飽和量抗體孵育，檢測液中含量高的抗原將減少標記抗原的結合，這樣通過已知標準曲線定量出不同目標檢測物的濃度；另一種是“三明治”分析法，是先把抗原吸附在固相上，然後將混有待測抗原的一抗抗體混合液與吸附在固相上的抗原孵育，沖洗掉已結合的抗體，再加入酶標記的二抗抗體與其共同孵育，最後測定標記抗體上酶催化底物產生的光吸收值的大小來確定農藥殘留的量，也可將一抗抗體直接用酶標記，然後測定結台抗體上的酶所催化底物產生的顏色反應。酶標記反應的固相支持物有聚苯乙烯、塑膠管、膜和微球。目前大多數採用96孔酶標板(MTP)作為固相支持物，這種板的檢測容量大，樣本數量多，其檢測反應結果只需有酶標儀的配合就可得出準確的檢測數據，與其他檢測手段相比，此種方法更易被使用者接受。