農桿菌介導轉化法

農桿菌能夠將Ti質粒上的T-DNA以單鏈的形式整合到宿主基因組中,使得科學家開始用農桿菌介導法將外源的Bt基因、除草劑基因以及一些營養改良基因轉入作物基因組,獲得轉基因作物。

基本介紹

  • 中文名:農桿菌介導轉化法
  • 外文名:Agrobacterium mediated reforming process
  • 性質:科學
  • 類別:生物
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農桿菌

是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位(受傷處的細胞會分泌大量酚類化合物,從而使農桿菌移向這些細胞),並誘導產生冠癭瘤或髮狀根。
根癌農桿菌和髮根農桿菌中細胞中分別含有Ti質粒和Ri質粒,其上有一段T-DNA,農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後,可將T-DNA插入到植物基因組中,並且可以通過減數分裂穩定的遺傳給後代,這一特性成為農桿菌介導法植物轉基因的理論基礎。

導轉化法

導轉化過程

農桿菌介導轉化過程主要分為兩步:
首先:農桿菌將T-DNA以單鏈的形式從Ti質粒上切下,然後與一系列Vir蛋白接個,這些過程都發生在農桿菌細胞內;
然後:與T-DNA相連的virE2蛋白上有核定位序列,在它的作用下,T-DNA被轉入宿主細胞,然後整合宿主基因組,整合的方式主要有雙鏈打開修復和單鏈缺口修復兩種方式。

導轉化宿主種類

目前,農桿菌介導轉化的宿主有植物愈傷組織、擬南芥花粉、動物體細胞 、真菌菌絲塊、真菌原生質體、真菌孢子等。

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