載體兩性電解質是一些具有相近等電點的分子量為600-900Da的多氨基多羥基兩性化合物的混合物。它在大於其等電點的pH環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小於其等電點的pH環境中解離成帶正電荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等於其等電點的pH環境中,即蛋白質所帶的淨電荷為零時才能停止。
基本介紹
- 中文名:載體兩性電解質
- 外文名:carrier ampholyte
- 原理:等電點的不同
- 成分:兩性化合物的混合物
- 性質:可溶性好,分子量小,不發螢光等
- 作用:抗污染,製藥等
載體兩性電解質是一些具有相近等電點的分子量為600-900Da的多氨基多羥基兩性化合物的混合物。它在大於其等電點的pH環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小於其等電點的pH環境中解離成帶正電荷的陽離子,向電場的負極泳動。這種泳動只有在等於其等電點的pH環境中,即蛋白質所帶的淨電荷為零時才能停止。
載體兩性電解質是一些具有相近等電點的分子量為600-900Da的多氨基多羥基兩性化合物的混合物。它在大於其等電點的pH環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小於其等電點的pH環境中解離成帶正電荷的陽離子,向電...
載體 載體兩性電解質是一些具有相近等電點的分子量為600-900Da的多氨基多羥基兩性化合物的混合物。它在大於其等電點的pH環境中解離成帶負電荷的陰離子,向電場的正極泳動,在小於其等電點的pH環境中解離成帶正電荷的陽離子,向電場...
1.可溶性要好,為了保證等電聚焦過程中PH梯度的形成和蛋白樣品的遷移,載體兩性電解質必須具有很好的溶解性能。2.紫外吸收低,不發螢光。由於製備分離時,檢測蛋白質的方法通常是測量280nm的吸光度,因此要求載體兩性電解質在280nm的吸...
等電點聚焦效應就是在電泳槽中放入載體兩性電解質,當通以直流電時,兩性電解質即形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度,當蛋白質放進此體系時,不同的蛋白質即移動到或聚焦於與其等電點相當的pH位置上,等電點聚焦聚焦的優點是:...
根據此原理,開始的等電聚焦在凝膠中預先由小分子載體兩性電解質形成ph梯度。載體兩性電解質是一些可溶性的兩性小分子,它們在其PI附近有很高的緩衝能力。當電壓加在載體兩性電解質混合物之間時,最高PI值的分子(帶正電荷最多的分子)移...
蛋白質分子在一個載體兩性電解質形成的連續而穩定的線性pH梯度中電泳,當蛋白質遷移到其等電點位置時.淨電荷為零.在電場中不再移動.因此可將各種不同等電點性質的蛋白質分離開來。2、SDS一聚丙烯醯胺凝膠電泳 十二烷基硫酸鈉(SDS)...
第一向套用載體兩性電解質(carrier ampholyte,CA),在管膠內建立pH梯度。隨著聚焦時間的延長,pH梯度不穩,易產生陽極漂移。(2) NEPHGE(non-equilibrium pH gradient electrophoresis)用於分離鹼性蛋白(pH>7.0)。如果聚焦達到平衡...
等電聚焦凝膠電泳依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為鹼性的連續的pH...
兩性電解質載體,實際上是許多異構和同系物的混合物,它們是一系列多羧基多氨基脂肪族化合物,分子量在300~1000之間。常用的進口兩性電解質為瑞典Pharmacia-LKB公司生產的Ampholine 和Pharmalyte,價格昂貴。國產的有中國軍事醫學科學院放射醫學...
載體介質 理想的兩性電解質載體應在pI處有足夠的緩衝能力及電導,前者保證pH梯度的穩定,後者允許一定的電流通過。不同pI的兩性電解質應有相似的電導係數從而使整個體系的電導均勻。兩性電解質的分子量要小,易於套用分子篩或透析方法將其...
利用固定相載體上偶聯的疏水性較強的配基,在一定非極性的溶劑中能夠與溶劑中的疏水分子發生作用,以非極性配基為固定相,極性溶劑為流動相來分離不同極性的物質的方法,稱之為反相層析。聚焦層析 利用固定相載體上偶聯的載體兩性電解質...
⑥凝膠套用液:PAG濃度為7.5%,內含1.6%兩性電解質載體(Ampholyte,pH4.0~6.5,Pharmacia);⑦0.2% CBBG250染色液;⑧脫色液:甲醇/水/乙酸溶液(5:5:1,V/V)。實驗方法 ①人血清VLDL的分離;取血清3.0ml,加入固體NaBr...
蛋白質在不同pH環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開。1、電泳法 各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性...
80年代開始採用固定化pH梯度膠,克服了載體兩性電解質陰極漂移等許多缺點而得以建立非常穩定的可以隨意精確設定的pH梯度。由於可以建立很窄的pH範圍(如0.05U/cm),對特別感興趣的區域可在較窄的pH範圍內做第二輪分析,從而大大提高了...
二、載體兩性電解質104 三、密度梯度等電點聚焦104 第九節高效毛細管電泳105 一、毛細管電泳分離模式105 二、毛細管電泳的特點106 三、毛細管電泳法的基本裝置107 四、毛細管電泳法的套用110 第六章免疫分析法 第一節概述112 第二節...
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在等電點外的所有其他pH值,依據蛋白質所帶淨電荷採用電泳和離子交換層析來分離和分離純化該蛋白質。等電點沉澱主要套用於蛋白質等兩性電解質的分離提純,還可套用於大豆異黃酮的分離:用等電點沉澱法脫去蛋白質,可提高異黃酮製品的...
723蛋白質的電泳行為105 724連續電泳和不連續電泳106 725聚丙烯醯胺凝膠電泳的基本裝置107 726凝膠電泳測定的步驟108 73等電聚焦109 731等電聚焦的基本原理109 732載體兩性電解質110 733凝膠...
7.3.4蛋白質分子量的測定183 7.3.5SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳的實驗方法183 7.3.6SDSPAGE的套用範圍184 7.4等電聚焦184 7.4.1原理185 7.4.2載體兩性電解質pH梯度的形成186 7.4.3載體兩性電解質等電聚焦方法187 7.4.4...
3 4 2蛋白質等電聚焦電泳的基本 原理183 3 4 3pH梯度的產生方式184 3 4 4載體兩性電解質184 3 4 5電泳條件的選擇186 3 4 6套用實例190 3 5雙向電泳193 3 5 1概述193 3 5 2雙向電泳技術 194 3 5 3雙向電泳模式的選擇...
電極液指電泳過程中裝於電泳槽浸埋電極的液體。根據電極的不同分為正極液和負極液,正極液用弱酸,負極液用弱鹼。電極液的作用是為了避免樣品或載體兩性電解質在正極氧化或在陰極還原。多用於等電聚焦電泳、毛細管電泳等技術中。(陸惠玲...
3 載體兩性電解質pH梯度等電聚焦 4 固相pH梯度等電聚焦電泳 第五章 免疫電泳 1 一般免疫電泳 2 對流免疫電泳 3 火箭免疫電泳 4 交叉免疫電泳 5 免疫共沉澱 第六章 蛋白免疫印跡試驗 1 傳統的蛋白質免疫印跡技術 2 蛋白免疫印跡...
2.2.3 等電聚焦利用同工酶的等電點不同,在電泳支持物中加入兩性電解質載體,因電場的作用,同 工酶在 PR梯度凝膠中泳動,當遷移至其等電點的 PH處,則不再泳動,而濃縮成狹窄的區帶。這種方 法解析度很高,但該法得到...
構建了幾種非病毒轉基因載體,研究了體外轉染行為和體內外的耐血清性,發現聚磺酸類兩性電解質修飾的陽離子載體不僅保持血清穩定性,而且體現增強的細胞攝取能力,有望成為PEGylation的重要補充。 將膠原/含糖聚合物互穿網路水凝膠表面種植...