豬細小病毒核酸探針的研製及病毒基因組序列分析

《豬細小病毒核酸探針的研製及病毒基因組序列分析》是依託中國農業大學，由甘孟侯擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：豬細小病毒核酸探針的研製及病毒基因組序列分析
• 依託單位：中國農業大學
• 項目負責人：甘孟侯
• 項目類別：面上項目
• 批准號：39370528
• 申請代碼：C1802
• 負責人職稱：教授
• 研究期限：1994-01-01 至 1996-12-31
• 支持經費：9（萬元）

項目摘要

本研究完成了BM-1株豬細小病毒（PPV）核酸探針的研製和序列分析，採用PK-15及仔豬腎細胞培養PPV，提取PF型DNA，用PstI/HindⅢ雙酶切後克隆隆於PUC19質粒載體中。分別雙酶切及單酶切該重組粒後，純化出線性DNA片段，用地高辛DNA檢測試劑盒來標記出探針1和探針2，檢測後發現其最低檢測出限分別為40pg和4pg。將該重組質粒作出3個亞克隆後，用自動測序儀按雙脫氧鏈終止法測出雙鏈的序列。用2對引物采和PCR-的方法，克隆出了從PvuII到DraI切點的VP2基因，2個亞克隆也採用相同的方法進行序列測定和分析。並為以後的基因工程疫苗研製奠定了基礎。